[发明专利]猪ESR1基因作为免疫性状相关的分子标记及其应用

说明书

本发明属于猪分子标记制备技术领域，具体涉及猪ESR1基因作为免疫性状相关的分子标记及其应用。本发明的分子标记克隆自ESR1基因的一个片段。其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，在该序列的第33碱基位发生一个等位基因突变，即A/G突变，该突变导致Sma1‐RFLP多态性。该基因的SNP突变位点获得的分子标记与猪的免疫性状相关。对该分子标记进行了关联分析，发现此多态位点与猪的免疫性状如血小板、红细胞压积、CD4‐CD8‐CD3‐呈显著相关，与血小板压积，平均红细胞体积，平均血红蛋白浓度等形状呈极显著相关。可作为检测猪免疫性状的相关标记。

技术领域

本发明涉及猪分子标记制备技术领域，具体涉及猪免疫性状相关基因ESR1的分子标记及其应用。本发明所述的分子标记可用于猪免疫相关性状的检测，所述的免疫性状包括免疫性状红细胞压积、平均红细胞体积、平均血红蛋白浓度、血小板、血小板压积、CD4-CD8-CD3-和CD4-CD8+CD3-。

背景技术

畜牧业在现代农业发展中占据着非常重要的地位，其在农业生产中所占有的比值通常用来衡量一个国家和地区发展程度的重要指标。猪肉作为我国最主要的肉类来源，在中国肉食消费中占据主导地位，可以说，我们的生活与猪肉息息相关。因此，生猪养殖产业在我国畜牧业中占据着举足轻重的地位。

随着我国养猪业的不断发展，猪病的种类越来越多，复杂程度不断加剧，控制也越来越困难。猪病对养猪生产的危害日趋严重，已成为制约我国养猪业健康、稳定发展的重要因素。猪病防治是养猪业发展的大事。近几年，虽然不少养猪场(户)为防治猪病投入了大量的人、财、物力，但很多都因猪病使养猪的利润受到影响，甚至亏损倒闭。“药越用越多，病越治越多”的现象屡见不鲜，猪病成了养猪生产的“瓶颈”(张秀芳，2013)。目前，我国主要从预防与治疗这两个方面来解决猪病。预防是指给动物接种注射能预防相应疫病的疫苗，从而增强动物的抗病能力，它是我们在动物疫病的预防控制过程中最重要的手段之一(WilliamHollis等，2003)。但是在实际工作中往往会岀现免疫后动物还会发生相应的疫病而死亡，或者已免疫接种的动物不产生免疫抗体或抗体水平很低的现象。即使工作人员按照猪场的正规免疫程序对健康状况良好的猪进行免疫接种，最后也往往会出现免疫失败的现象(王强等，2009)。在保证疫苗质量良好，免疫操作规范，猪场管理合理的情况下，个体机体状况与应激反应就成了影响免疫接种效果的重大因素。个体机体状况主要与遗传因素有关，动物机体对接种抗原有无免疫应答，在一定程度上是受遗传控制的，动物品种繁多，免疫应答各有差异，即使同一品种不同的个体，对同一疫苗的免疫反应强弱也不一致。有的动物甚至有先天性免疫缺陷，从而导致免疫失败。由于猪免疫应答差异，造成仔猪母源抗体水平参差不齐，即使是同一猪群中的不同个体之间母源抗体程度也不一致。各种应激反应都会干扰免疫应答，如惊吓、注射、保定，光线过强、舍温过高、湿度过大，过敏反应等应激，都会影响免疫的效果。当给猪群注射疫苗时，猪体会对疫苗产生特异性的免疫反应，在一定程度上，这种反应是有益的，但如果反应过度，会出现过敏反应，如果严重，会对猪群产生致命影响。在生产过程中，即使做好预防免疫工作，猪群里的一些个体依然会受到感染产生疾病，针对这种情况，我国主要是采取药物治疗。但是，近年来发现，药物对猪病的防治效果越来越差，且病越来越多，一方面是药物方面的一些原因，另一方面则是猪病方面的一些原因(张秀芳等，2013)。近些年，在使用抗菌药物时遇到的首要问题是细菌的耐药性，它已成为药物疗效降低的一个重要原因(聂奎等，2009)。由于长期滥用抗生素，各地不断产生具有“多重耐药性”的菌株，它们分布相当广泛，这使得人们在选择药物时十分茫然，使用效果也不明显(陈伟华等，2010)。且近些年的猪传染病，大多是以猪免疫系统受损而导致多种细菌并发、继发或混合感染，同时还有许多新病原体的出现或老病原体发生变异，改变了病原体与猪体之间原有的相互关系，还造成一些猪传染病以非典型或综合征的形式出现，这给猪病的防治造成极大的难度。在现实中，很多缺乏药物或兽医知识的养猪者，经常频繁和大量同时用多种药物防治猪病，不但治不了病，还会造成严重后果。许多养猪场(户)，预防为主的观念尚未得到落实，未能将“防重于治”提升到“养重于防”的高度。健康猪本身具有较强的抗病能力或免疫力，尤其是一些免疫抑制性疾病，健康的猪群可明显减少发病，只有通过这种根本性的防病措施，才能大幅度减少使用药物的概率和数量，“健康养殖”才是防治猪病唯一正确的观念。而“健康养殖”的首要前提是选取免疫性能良好的健康猪进行养殖。本申请中，我们发现ESR1基因中的一个SNP位点，该位点与免疫性状血小板、红细胞压积、CD4-CD8-CD3-呈显著相关，与血小板压积，平均红细胞体积，平均血红蛋白浓度呈极显著相关，因此其可以用作群体育种的分子标记，进行早期选择，从而缩短世代间隔，提高选择强度，选种效率和准确性，在动物育种中具有广阔的应用价值。