[发明专利]一种鸭儿芹的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鸭儿芹的繁育方法，特别地涉及一种鸭儿芹的组织培养方法，属于农业栽培技术领域。

背景技术

鸭儿芹(Cryptotaenia japonica Hassk.f.japonica)属伞形科，鸭儿芹属，为多年生草本。通常生于海拔200-2400米的山地、山沟及林下较阴湿的地区。我国南北各省(区)均有分布，朝鲜和日本也有。

鸭儿芹可全草入药，治虚弱，尿闭及肿毒等，民间有用全草捣烂外敷治蛇咬伤。种子含油约22％，可用于制肥皂和油漆。鸭儿芹是日本重要的栽培蔬菜之一。主要食用柔嫩的茎叶，有特殊的风味，主要用作汤料或做成“色拉”菜生食。因其易于生长，耐阴湿环境，也可作地被植物，应用于园艺造景中的角落、林下等荫蔽环境。因此，鸭儿芹无论对调剂市场蔬菜品种，对有机蔬菜的生产和创汇型农业的开发，还是丰富园林造景中地被植物的栽培种类，都具有十分重要的意义。

目前关于鸭儿芹的研究极少，国内的研究领域主要涉及一些特性的简单描述，以及种子萌发和栽培技术的研究。鸭儿芹休眠期长、种子萌发慢、发芽率普遍较低，采用常规的种子繁殖方法速度慢。国内仅有一篇文献涉及到鸭儿芹种子休眠破除的方法，但从种子处理到发芽仍需要较长的时间(35～50天)，并未加快种子发芽速度。组织培养技术具有繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，能保持原有品种的优良性状，不受季节的限制等优点，目前国内对鸭儿芹的组织培养研究仅有一篇报道，并且存在侧芽诱导率低、愈伤组织不能继续分化产生不定芽的问题，无法进行鸭儿芹的大量繁殖。

授权公告号为CN 103988667B，授权公告日为2016年3月23日的中国授权发明专利中，公开了一种鸭儿芹引种栽培方法，该发明能使鸭儿芹发芽快，发芽率高，用该发明的栽培方法能实现鸭儿芹周年生产和高产。但是，这种鸭儿芹的引种栽培方法，所需的时间较长，且种子的发芽率较低，并不适合大量繁殖。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，而提供一种繁殖系数提高，适合大量繁殖的的鸭儿芹的组织培养方法。

本发明解决上述问题所采用的技术方案是：该一种鸭儿芹的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体消毒处理：选取生长良好的鸭儿芹一年生嫩茎，依次用洗衣粉浸泡10min，自来水冲洗3h，用75％乙醇灭菌20～40s，无菌水冲洗3～5次，再用质量浓度为1.5～3.5％的NaClO灭菌5～10min，无菌水冲洗3～5次后，用灭菌滤纸吸干表面水分，最后将消毒处理后的鸭儿芹置于无菌干净的培养皿中备用；

(2)愈伤组织诱导：将步骤(1)中消毒好的鸭儿芹嫩茎切成约1cm的小段，竖直插入诱导培养基中，进行暗培养30天，温度23～25℃；

(3)分化培养：将步骤(2)中产生的愈伤组织接入分化培养基中培养6周，温度23～25℃，光照12h/d，光照度为2000～2400lx；

(4)生根培养：将步骤(3)中产生的丛生芽切成单株，接入生根培养基中培养，温度23～25℃，光照12h/d，光照度为2000～2400lx，2周后，基部长出根系，长度达到2～5cm；

(5)炼苗和移栽：将步骤(4)中高度大于4cm，叶片在4～6片，根系长度2～5cm的鸭儿芹组培苗进行炼苗，先将培养瓶的瓶盖打开，室温下炼苗3d后，取出试管苗，洗净根部的培养基，移栽到准备好的基质上，保持温度不低于10℃，不高于30℃，湿度85％～95％，适当遮阴，常规管理。

本发明所述步骤(2)中的诱导培养基为MS培养基，所述培养基内加入0.5～1.0mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂粉，调节pH为5.8。

本发明所述步骤(3)中的分化培养基为MS培养基，所述培养基内加入1.5～2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.1～0.2mg/L的萘乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂粉，调节pH为5.8。

本发明所述步骤(4)中的生根培养基为1/2MS培养基，所述培养基内加入0.5～1.5mg/L吲哚丁酸、30g/L蔗糖和7g/L琼脂粉，调节pH为5.8。

本发明的优点为：本发明的方法用于鸭儿芹组织培养，克服其种子休眠期长、发芽率低等缺点，具有繁殖速度快，繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，移栽成活率高的优点。可达到规模化生产的要求，而且能有效保持母本的优良遗传性状，保证了种苗的品质和质量。

具体优点为：