[发明专利]血清中游离脂肪酸的LC/MS/MS联用法检测试剂盒

权利要求书

1.一种高效液相色谱质谱联用法检测试剂盒，其特征在于，包括：

(1)质控品，所述质控品中含有选自下组的5-8种游离脂肪酸：十六碳一烯酸、十八碳一烯酸、十八碳二烯酸、十八碳三烯酸、二十碳一烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸；

(2)同位素内标提取液，所述同位素内标提取液包含甲醇、乙酸乙酯；

(3)稀释液，所述的稀释液为乙腈；

(4)转化液，所述的转化液为乙酰氯和3-吡啶甲胺；

(5)复溶液，所述的复溶液为乙醇；和

(6)流动相添加剂A，所述的流动相添加剂A为饱和一元羧酸。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括选自下组的部件：(7)96孔反应板或(8)说明书。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括：用于建立标准曲线的牛血清白蛋白基质。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述流动相添加剂A选自下组：甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、或其组合。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述流动相添加剂A为甲酸。

6.一种通过高效液相色谱质谱联用法测定所取的生物样品中游离脂肪酸的量的方法，包括步骤：

(i)通过利用大气压化学电离(APCI)对所述游离脂肪酸和内标进行电离，分别产生所述游离脂肪酸和所述内标的至少一种前体离子；

(ii)分别产生所述游离脂肪酸和所述内标的所述前体离子的一种或多种碎片离子；和

(iii)比较步骤(i)或(ii)或两者中产生的所述游离脂肪酸代谢物和所述内标的一种或多种所述离子的量以确定所述生物样品中的所述游离脂肪酸的量；

其中，色谱检测过程中的流动相中加入甲胺。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(i)中，所述前体离子的质/荷比选自下组的一个或多个：345.3、373.3、371.3、369.3、401.3、395.3、393.3、419.3、389.3、387.3、403.3、424.3。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(ii)中，所述碎片离子包括质/荷比为92.0±0.5的离子。

9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(ii)中，所述碎片离子质/荷比选自下组的一个或多个：92.0、92.1、92.2。

10.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述液相色谱采用梯度模式洗脱，液相色谱条件包括：

色谱柱：Synergi Polar-RP(2.0×50mm,5μm)；

柱温：40℃；

流速：500μL/min；

流动相A：按1:1000的比例将流动相添加剂A-甲酸加入到水溶液；

流动相B：按1:1000的比例将流动相添加剂A-甲酸加入到甲醇溶液。