[发明专利]红杆铁皮石斛人工杂交提纯复壮繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药材种植，尤其是涉及到红杆铁皮石斛种苗用于生产高品质

产品的繁殖方法。

背景技术

铁皮石斛Dendrobium candidum Wall．Ex Lindl是《中华人民共和国药典》收载的名贵中药，是我国传统名贵中药。味甘，性微寒；入胃、肾经，具有益胃生津、滋阴清热的功效，用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软。是兰科石斛属药用植物中最为珍稀的品种，它生长缓慢、自然繁殖率极低。近年来，由于铁皮石斛原生地生境破坏、气候变迁和滥采滥挖严重，自然生长环境日益恶化，野生资源频临枯竭，目前生产铁皮石斛种苗，主要采用了组织培养无性繁殖技术，这种技术易造成铁皮石斛种性混杂和不断退化，品种内一致性差，世代之间遗传稳定性差等问题。导致我国铁皮石斛产业存在优良新品种缺乏、后备品种不足、品种结构不合理、优良品种覆盖率低等问题。种植企业亟需获得种性优良品质纯正的种苗用于生产。铁皮石斛又分为青杆铁皮石斛和红杆铁皮石斛，红杆铁皮石斛相对青杆铁皮石斛长得稍慢些，不过其抵抗能力较好，耐寒性较好，药性功效较好，售价高，因此大多数年种植企业选择红杆铁皮石斛种苗进行种植。现有种植企业在种苗种植中大都采用人工杂交授粉、无菌播种、壮苗培养和管苗移栽的繁殖方法，虽然根据繁殖地点、气候、土壤和生长环境不同，具体的繁殖方法也有不同，但到目前为止，现有技术中种苗生产出来的红杆铁皮石斛枝条红杆率不超过90%，红杆铁皮石斛的品质不够好，产量也不高。

发明内容

针对上述现有技术方法培育的红杆铁皮石斛种苗生产出来的红杆铁皮石斛所存在的问题，本发明提供了一种可使红杆铁皮石斛枝条红杆率达到98 %以上，红杆铁皮石斛品质好、药用价值高，产量高的红杆铁皮石斛种苗繁殖方法。

本发明所述的红杆铁皮石斛人工杂交提纯复壮繁殖方法包括以下步骤：

A、野生原种的采集

分别采集安徽天柱山和齐云山的野生铁皮石斛原种植株，栽培于花盆中，

B、原种筛选

从上述原种植株中，筛选出3年生以上生长健壮、萌枝力强和枝条红杆率为100%的原种植株作为杂交亲本备用,

C、人工授粉

在上述筛选的原种植株夏秋开花期间，以天柱山野生铁皮石斛原种植株作父本，以齐云山野生铁皮石斛原种植株作母本，进行人工杂交授粉,

D、提纯复壮

待原种植株蒴果成熟时,采收外观紫红色，且着色均匀，端正饱满尚未开裂的果实，经无菌操作处理后，在无菌条件下，将果实切口，将果实中的种子播撒于萌发培养基上发芽生长成幼苗，幼苗再经生根培养后，获得实生苗进行栽培；再在上述栽培的实生苗植株中选择生长健壮、萌枝力强和枝条红杆率达到100%的实生苗植株进行异花授粉，待蒴果成熟时,采收外观紫红色且着色均匀，端正饱满尚未开裂的果实作为种子，留种子作为生产备用,

E、培养育苗

a、通过无菌操作，将上述留作生产备用的种子，播撒于萌发培养基上发芽生长，经过20-30天完成萌发培养，所述萌发培养基由下列原料配制而成：1/2MS＋5%的蕨根粉＋5g/L的酵母粉＋2g/L的牛肉膏＋5g/L的活性炭，

b、幼苗生根培养

将萌发培养基生长出的原球茎接种于生根培养基上，所述生根培养基由下列原料配比制成：MS＋10%的红龙果＋5%的蕨根粉＋5%的椰子汁＋5g/L的活性炭，经过30-40天可完成幼苗生根培养；

F、炼苗出苗

炼苗移栽前，将幼苗小心取出，用50%多菌灵1000倍液将根部培养基冲洗干净得到种苗，种苗凉干后装箱出售。

进一步地，本发明所述方法步骤E中的a和b之间还包括：

将萌发培养基上发芽生长出的原球茎接种于增殖培养基上，经过20-30天完成原球茎增殖培养，所述增殖培养基由下列原料配制而成：MS＋10%的红龙果＋5%的蕨根粉＋3g/L的牛肉膏＋5g/L的活性炭，

本发明所述方法种植的种苗生产出来的铁皮石斛枝条红杆率达到98-100%，品质为上品，产量高。

所述MS为MS培养基，有1/2MS、1/4MS、MS等，所需药品原料在市场上均可购买，MS特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。