[发明专利]一种吴屯杨微繁的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物微繁生产技术领域，本发明涉及一种吴屯杨微繁的方法。

背景技术

我国为世界盐碱地大国之一,近1/5耕地发生盐碱化，随着国民经济和社会的迅速发展,人口增长与耕地减少的矛盾日益突出,各类盐碱土地成为重要的土地后备资源。通过培育耐盐的植物新品种,提高土地利用率、降低盐碱灾害影响,是提高生态效益和经济效益的有效途径。近年来,国内外相继推出一批速生、抗旱、耐盐碱、抗病虫害的杨树杂交,吴屯杨具有速生、抗旱、耐盐碱、抗病虫害等特性，并其遗传稳定性好。

吴屯杨是杨树天然杂交种选育而来，来源于新民市大柳屯镇吴屯村。具有根系发达，适应性强、生长快、成材早、生长周期长；枝条细密防风性能好、抗盐碱能力强等特点，是一种很好的绿化树种，已在三北地区进行试验推广。目前吴屯杨的扩繁推广主要是利用通过扦插繁育，繁殖效率较低，扦插繁殖周期长，受季节等诸多因素限制了其大规模繁殖，组织培养的方法可解决其扦插繁殖过程中的一些问题并可在短时期内获得大量组培苗，但是常规的组织培养耗时耗力，难以实现规模化生产。因此开发一种新的吴屯杨微繁技术克服原有的培养方式缺点，确保吴屯杨幼苗产业的进一步发展。

发明内容

本发明针对上述存在的问题，本发明提供了一种吴屯杨微繁的方法，不仅能缩短吴屯杨育苗周期，提高增殖效率，还能够提高育苗成活率。

本发明的技术方案如下：一种吴屯杨微繁的方法，该方法包括如下步骤：

(1)外植体的选取

选择吴屯杨茎段为外植体；

(2)外植体的消毒处理

将上述茎段每隔1-2个芽进行切段，将切下后的茎段用水冲洗30min，然后将茎段放入无菌超净台，用75vt％的酒精浸泡30s，再使用无菌水冲洗3次，再用0.1wt％的升汞浸泡5min，用无菌水冲洗5次；

(3)外植体芽诱导

将步骤(2)处理得到的外植体插入芽诱导培养基当中，进行芽诱导，得到丛生芽；

(4)芽分化与增殖培养

将经过步骤(3)诱导的丛生芽切下，插入分化培养基进行培养；所述的分化培养基配方：以MS为基础培养基：添加6-BA(6-苄氨基嘌呤)0.4-0.6mg/L、NAA(萘乙酸)0.1-0.3mg/L、琼脂7-10g/L、蔗糖30-50g/L,pH为5.80-5.84，在光照下培养12-17天，得到丛生芽；

(5)抽茎生根培养

将步骤(4)分化的丛生芽切下进行抽茎培养；

抽茎生根培养基配方：以MS为基础培养基：添加6-BA(6-苄氨基嘌呤)1.8-2.1mg/L、NAA(萘乙酸)0.1-0.3mg/L、琼脂7-10g/L、蔗糖30-50g/L，pH为5.80-5.84，在光照下培养12-17天，得到吴屯杨组培苗；

(6)炼苗与移栽

选取根系发达及健壮的吴屯杨组培苗，取出后洗净根部培养基，在沙床上驯化10天后，即可作为移栽幼苗。

进一步的，步骤(2)所述的茎段为2-3cm。

进一步的，所述的芽诱导培养基配方：MS培养基，调整pH为5.80-5.84，在25-28℃光照培养8-15天，得到丛生芽。

进一步的，所述的沙床的温度为25-30℃，湿度为70-80％。

进一步的，所述的沙床在驯化前使用0.1-0.2wt％高锰酸钾消毒。

本发明的有益效果如下：

1.本发明在分化培养期间，适当的调整6-苄氨基嘌呤和萘乙酸的比例，最终筛选得到最适宜的不定芽分化培养基，显著的提高了吴屯杨不定芽的分化率，最终提高杨树幼苗的成苗棵数。

2.本发明在育苗培养期间，适当的调整6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、生长素的比例，筛选出最适宜的抽茎生根培养基配方，确保培养基能够提高苗的质量，使苗生长健壮，根细长，有韧性，进一步提高移栽后成活率，保证苗的成苗率(见表1、2)。

3.本发明在育苗时，将现有技术中的抽经、生根步骤合二为一，并对抽茎生根培养基做出研究，提出了本发明的抽茎生根培养基的配方，可直接进行抽茎生根培养，这样的设计大大减少了育苗所需时间，具有极大的推广价值；而且在工业化生产过程中减少生产占用面积，减少资金投入，提高工业化利润。

4.吴屯杨组织培养处于起步阶段，本发明以茎段为外植体，通过激素诱导腋芽萌发，将幼芽进行增殖培养，可获得大量无性繁殖幼芽(增值倍数9.73倍)，可使吴屯杨组培苗的繁殖系数可提高近10倍。