[发明专利]一种那西肽提纯方法

说明书

技术领域

本发明属于化学制药领域，具体涉及一种兽药饲料添加剂那西肽的提纯方法。

背景技术

那西肽是由活跃链霉菌产生的一种含硫多肽类抗生素，因其在肠道内不易吸收，排出体外后又可以迅速分解，所以具有无残留、不易产生耐药性、与其他抗生素也无交叉耐药性、对环境影响小等特点。那西肽能明显促进鸡、猪等的生长并增加出肉率，目前已被视为一种新型的非吸收型的环保饲料添加剂。

现有的那西肽的提纯制备方法主要包括以下几种：

乙醇溶剂浸提，正丁醇反萃取(如：李霞等，饲料添加剂那西肽的分离提取和精制，工业微生物，1991,21(1):19-22)。此方法中正丁醇萃取液浓缩温度高，而那西肽在高温下不稳定，所以给提取工作带来很大困难；正丁醇萃取时容易产生大量乳化层，分离乳化层使产品的收率大大降低(粗品70％，精品50％)。

N,N-二甲基甲酰胺(DMF)浸提，蒸馏浸提液得到浓缩液，进而加入蒸馏水结晶，最后纯化粗品。此方法制备，蒸馏温度高，那西肽易分解；制备过程中需要结晶制备，工艺路线繁琐。

可见现有的提纯方法难以满足工业化生产的要求。有必要提供一种工艺过程简便、生产周期短、环境友好的工业化那西肽提取工艺，以期推动那西肽应用领域的发展。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中存在的上述问题，提供一种生产工艺简便、生产周期短、环境友好、产率高和纯度好的那西肽提纯方法。

为达到以上目的，本发明提供了一种那西肽提纯方法，包括利用二氯甲烷和甲醇的混合浸提剂对那西肽生产发酵后的固体部分进行浸提获得浸提液，去除浸提液中的二氯甲烷和甲醇得到那西肽粗提物，用正己烷对所述那西肽粗提物进行洗涤得到那西肽精制物。

其中，在二氯甲烷和甲醇的混合浸提剂中，二氯甲烷与甲醇的体积比为0.3-7:1。

优选的情况下，为了进一步提高那西肽的浸提效果，二氯甲烷与甲醇的体积比为1-6:1。

其中，所述那西肽生产发酵后的固体部分是通过对那西肽生产发酵后获得的发酵产物进行固液分离所获得的。本发明中对于进行固液分离的方法没有特别的限制，只要能够比较充分的排除发酵产物中的水分即可，可以采用本领域常规的对发酵产物进行固液分离的方式，例如可以采用静置、离心、板框过滤的方式。优选的，通过板框过滤的方式挤压排出水分，获得湿的滤饼后进行闪蒸干燥。得到干燥粗品，水分含量约为5％～8％。将干燥粗品通过粉碎机粉碎，最终得到那西肽粗品粉末即所述那西肽生产发酵后的固体部分。

本发明对于进行那西肽生产发酵的菌株的具体种类没有特别的限制，可以是本领域已知或未知的任何能够进行那西肽发酵生产的菌株。在本发明的一种优选的实施方式中，所述发酵产物是利用放线菌streptomyces actuosus在那西肽发酵培养基中发酵所获得的发酵产物。

本发明对于那西肽发酵培养基的组分没有特别的限制，只要能够用于通过发酵培养那西肽生产菌株经过本领域公知的发酵过程获得含有那西肽的发酵产物即可。

优选的，浸提的步骤还包括首先将所述混合浸提剂与那西肽发酵生产后的固体部分接触混合，获得浸提体系，对所述浸提体系进行超声混匀，具体的，可以将所述浸提体系在50-150赫兹的超声波下超声混匀0.5-1h。

优选的，在超声混匀后将所述浸提体系在38-42℃下恒温浸提0.8-1.2h。

进一步的，在本发明的一种实施方式中，为了获得较好的浸提效果，优选在恒温浸提后将浸提体系转入振荡器在150-200rpm下震荡2-4h。

为了能够充分的实现那西肽的浸提，优选进行两次浸提步骤，在第一次浸提后，离心分别回收沉淀和浸提液，回收的沉淀再用新的二氯甲烷和甲醇的混合浸提剂进行浸提，步骤和条件与第一次浸提相同。

可选的，相对于100g那西肽生产发酵后的固体部分，所述二氯甲烷和甲醇的混合浸提剂的用量为600-1000ml。

当进行两次浸提时，第一次浸提和第二次浸提所用的混合浸提剂的体积比为2-3：1。

可选的，对所述浸提液进行减压蒸馏去除浸提液中的二氯甲烷和甲醇得到那西肽粗提物。

在本发明的一种优选的实施方式中，利用减压蒸馏的方式将浸提液中的二氯甲烷和甲醇去除，减压蒸馏优选在40-70℃的水浴条件下进行。

在本发明中，相对于100g那西肽粗提物，每一次洗涤操作所使用的正己烷的用量为80-150ml。