[发明专利]一株产β-苯乙醇的库德里阿兹威毕赤酵母菌株及其应用

说明书

本发明涉及一株生物转化L‑苯丙氨酸制备β‑苯乙醇的库德里阿兹威毕赤酵母菌株及其培养方法与应用，名为Pichia kudriavzevii Y1511菌株，已于2016年5月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC 12567；该菌株的26S rDNA D1/D2序列与其它多株库德里阿兹威毕赤酵母的26S rDNA D1/D2序列有99%的相似性；该菌株具有较好的糖耐受性、乙醇耐受性和苯乙醇耐受性，生长pH和温度范围宽广；本发明筛选出的库德里阿兹威毕赤酵母Y1511具有β‑苯乙醇产量高的特点，经检测，该菌株β‑苯乙醇产量可达1.0‑11.0 g/L，有利于该菌株在β‑苯乙醇工业化生产中的应用，具有反应条件温和、产品绿色天然、成本较低、环境友好等优点。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体地说涉及一株新分离产β-苯乙醇的酵母菌株及其培养方法与应用。

背景技术

β-苯乙醇是一种具有令人愉快的玫瑰花香味的无色粘稠液体，香气柔和淡雅，细腻持久，颇受人们喜爱，其天然存在于玫瑰、茉莉、风信子、茶叶、水仙、黄兰和百合等许多植物的精油中，尤其是在被称之为“液体软黄金”的玫瑰精油中，其含量可以达到60%。β-苯乙醇具有的玫瑰香味深受人们欢迎，是所有玫瑰香型香气的基本组分，使其在食品、化妆品、洗涤日用品、烟草和药品等中具有广泛的应用，成为继香兰素之后的第二大香精香料。

全球β-苯乙醇的年消耗量近万吨，基本是采用化工原料苯或苯乙烯通过化学合成的方法来生产，而化学合成所使用的廉价化工原料苯或苯乙烯多属于致癌物质，不仅对人体健康和环境都有巨大危害，而且还含有一些不良气味的副产物，严重影响了β-苯乙醇的品质。随着人们生活质量的提高，消费者越来越注重食品、日用品等的安全性，更倾向于天然食品添加剂。虽然从玫瑰或玫瑰精油中提取β-苯乙醇相对安全，但仅占极少量，并且该方法周期长、生产成本高，每5吨玫瑰花才可以提炼1千克玫瑰精油，远不能满足消费者的需求。微生物在合成生产天然β-苯乙醇方面具有生产成本低、周期短、对环境污染少等优点，因此，微生物合成方法是一条经济有效的途径，必将成为生产天然β-苯乙醇的主流。

许多酵母菌具有合成β-苯乙醇的能力，如发酵毕赤酵母（Pichia fermentans）、马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus）、酸酒酵母（Saccharomyces vini）、产朊球拟酵母（Torulopsis utilis）、乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和异常汉逊酵母（Hansenula anomala）等，但酵母自身合成β-苯乙醇浓度比较低，工业化前景不大，而以L-苯丙氨酸为底物，通过Ehrlich途径转化生产β-苯乙醇则具有很好的可行性。在采用生物转化生产天然β-苯乙醇的过程中，需要解决的关键问题是如何从源头上提高产β-苯乙醇的能力，即寻找更高产β-苯乙醇微生物菌株是解决这一问题的关键。

随着白酒现代化分析研究发现，β-苯乙醇是我国米香型酒、豉香型酒等白酒中的特征风味物质，对于白酒的风味具有重要的影响。从白酒酿造体系中获得能高产β-苯乙醇的功能微生物，并将其强化应用到白酒酿造体系中，对于提高白酒中β-苯乙醇含量，提升白酒品质具有重要意义。库德里阿兹威毕赤酵母是白酒酿造中存在的一类酵母菌株，在白酒酿造中具有提高酯类含量，提升白酒品质的作用。前期研究一直关注其产酯类化合物方面，而有关其产β-苯乙醇的能力未见相关研究。

发明内容

针对天然绿色β-苯乙醇不能满足市场需求的问题，以及提高传统酿造食品白酒中β-苯乙醇含量，提升白酒品质的实际应用，本发明目的在于提供一种从白酒酒曲中新分离的高产β-苯乙醇的菌株，命名为Y1511，并提供Y1511产β-苯乙醇的培养基及培养方法与应用。