[发明专利]一种增效型抗病菌及其培养方法和应用

说明书

本发明涉及一种增效型抗病菌及其培养方法和应用，该增效型抗病菌为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)，其微生物保藏登记号为：CGMCC No.7847；其培养方法选用SD23菌株作为第一轮筛选的出发菌株，制备菌悬液，依次进行自然分离筛选、诱变处理筛选及高浓度申嗪霉素培养基培养筛选，并将高浓度申嗪霉素培养基培养筛选得到的菌株作为下一轮筛选的出发菌株，重复该过程多轮，最终得到目标菌株。与现有技术相比，本发明的增效型抗病菌对申嗪霉素耐药性好，与申嗪霉素配置成复配剂，使用安全，能够提高水稻纹枯病及西瓜枯萎病的防治效果，增加产量，又能降低申嗪霉素的使用量，从而降低成本。

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其是涉及一种增效型抗病菌及其培养方法和应用。

背景技术

防治水稻、蔬菜、水果等真菌性病害，目前以化学农药为主，对环境及人体带来了许多不良影响，申嗪霉素是一种新型高效低毒的生物农药，目前由于成本还相对较高，从而造成使用面积还比较小，如何提高申嗪霉素对水稻纹枯病等真菌性病害的防治郊果，及降低使用成本，开发新型制剂，使之能更为广泛的用于农作物生产中，已经成为技术人员的攻关方向。

目前市场上有一些芽孢杆菌作为一种生物农药在销售，但是要想达到理想的效果还是比较难，而且不能与一些抗菌性农药一起施用。申嗪霉素本身做为一种农用抗生素，不仅对真菌性病害有很好的效果，而且还对细菌性病害也有较好的效果，因此，普通的芽孢杆菌在浓度不高的申嗪霉素下就可能被抑制甚至杀死，所以要找到一株能够耐受高浓度申嗪霉素的菌株，而且该菌株要与申嗪霉素能够互相增效，才能很好的用于农业生产上。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种增效型抗病菌及其培养方法和应用。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种增效型抗病菌，为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)，其微生物保藏登记号为：CGMCC No.7847；保藏时间：2013年7月3日；保藏单位：保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心China General Microbiological Culture Collection Center(CGMCC)；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院，中国科学院微生物研究所。

选用SD23菌株作为第一轮筛选的出发菌株，制备菌悬液，依次进行自然分离筛选、诱变处理筛选及高浓度申嗪霉素培养基培养筛选，并将高浓度申嗪霉素培养基培养筛选得到的菌株作为下一轮筛选的出发菌株，重复该过程多轮，最终得到目标菌株。

所述的自然分离筛选采用将出发菌株接种于斜面培养基上，于32℃下培养2-3天后将得到的芽孢冲洗下来制成芽孢悬液，用生理盐水稀释成不同位数的稀释液，将稀释液在平板上涂布，于30-37℃培养2-4天，挑选出菌株。

所述的诱变处理包括紫外线处理、紫外线/氯化锂复合处理、快中子处理、X光处理和Co60处理。

所述的紫外线处理的条件为：将自然分离筛选得到的菌株制备成菌悬液，并将菌悬液置于培养皿中，在10-15W的紫外灯下距离5-50cm避光照射0.5-5min后，稀释涂布；

所述的紫外线/氯化锂复合处理的条件为：将自然分离筛选得到的菌株制备成菌悬液，进行紫外线处理，稀释，稀释后的菌悬液在0.1-1wt％的氯化锂的天冬素-葡萄糖培养基中于25-35℃下培养5-10天，稀释涂布；

所述的快中子处理的条件为：将自然分离筛选得到的菌株制备成菌悬液，放在静电加速器产生快中子的减速剂铍旁，处理剂量为20krad-6krad，处理时间为0.1-2min，稀释涂布；

所述的X光处理的条件为：将自然分离筛选得到的菌株制备成菌悬液，以2000-50000伦琴剂量处理0.5-50s，稀释涂布；