[发明专利]蛋白质表达或阻抑的系统、方法和设备

权利要求书

1.制备诱导细胞质体中蛋白质产生的表达系统的方法，该方法包括步骤

将第一个核酸引入细胞核中，其中第一个核酸编码诱导型启动子；

将第一个核酸与第二个核酸可操作地连接以形成重组核酸，其中第二个核酸编码稳定性因子；

其中引入诱导物或去除阻抑物诱导该稳定性因子的表达；

其中表达的稳定性因子在质体中与mRNA非翻译区结合，所述mRNA由该稳定性因子稳定并且由第三个核酸转录；

其中所述第三个核酸是质体天然的或质体外来的，且其中所述第三个核酸编码蛋白质；且

其中mRNA的表达导致该蛋白质的产生。

2.权利要求1的方法，其中在把重组核酸引入核中之前将第一个核酸与第二个核酸可操作地连接以形成重组核酸。

3.权利要求2的方法，其中细胞具有第二个核酸的无效拷贝或失去第二个核酸的拷贝或同源物。

4.权利要求1的方法，其中细胞具有第三个核酸的无效拷贝或失去第三个核酸的拷贝或同源物。

5.权利要求1的方法，其中细胞是植物细胞或藻类细胞。

6.权利要求5的方法，其中质体选自叶绿体、白色体、造粉体、黄化质体、油质体和色质体。

7.权利要求1的方法，其中诱导型启动子具有与Cyc6启动子至少90％的序列相似性。

8.权利要求1的方法，其中第三个核酸编码具有与psbD基因至少90％的序列相似性的基因。

9.权利要求1的方法，其中诱导物是化学药品或环境条件。

10.权利要求9的方法，其中化学药品是铜，且铜耗尽诱导mRNA表达及蛋白质产生。

11.权利要求9的方法，其中环境条件是将氧浓度降低到预先确定的水平。

12.权利要求1的方法，其中将诱导物应用和去除多个循环，其中循环包括应用和去除诱导物。

13.权利要求1的方法，其中蛋白质是涉及氢气产生的蛋白质。

14.权利要求1的方法，其中蛋白质选自药物试剂、工业酶、涉及叶绿体成熟或降解的酶和营养药。

15.权利要求14的方法，其中药物试剂选自抗体、疫苗和抗微生物剂。

16.权利要求1的方法，其中稳定性因子选自Nac2和Mbb1。

17.权利要求1的方法，其中在质体中表达额外核酸，所述额外核酸与第三个核酸可操作地连接或未与第三个核酸连接。

18.权利要求14的方法，其中蛋白质选自宿主细胞防御产物、涉及氨基酸合成的酶、以及蛋白酶。

19.制备阻抑细胞质体中质体蛋白质表达的表达系统的方法，该方法包括步骤

将第一个核酸引入细胞核中，其中第一个核酸编码阻抑型启动子；

将第一个核酸与第二个核酸可操作地连接以形成重组核酸，其中第二个核酸编码稳定性因子；

其中引入阻抑物或去除诱导物阻抑稳定性因子的表达；且

其中稳定性因子表达的阻抑导致mRNA表达的阻抑，其中该mRNA由该稳定性因子稳定并且由第三个核酸转录；

其中所述第三个核酸是质体天然的或质体外来的，且其中所述第三个核酸编码蛋白质；且

其中该蛋白质的表达被阻抑。

20.在细胞质体中表达质体蛋白质的方法，该方法包括步骤：

将细胞与诱导物接触，或在导致阻抑物去除的条件下处理细胞；

其中诱导物或阻抑物在核中与第一个核酸结合；

其中第一个核酸编码诱导型启动子；

其中第一个核酸与第二个核酸可操作地连接以形成重组核酸，且其中第二个核酸编码稳定性因子；

表达该稳定性因子；

将稳定性因子引入质体中，其中稳定性因子在质体中与mRNA非翻译区结合以稳定mRNA，其中mRNA由第三个核酸转录，所述第三个核酸是质体天然的或质体外来的，且其中所述第三个核酸编码蛋白质；

表达该mRNA；且

在质体中生产蛋白质。

21.权利要求20的方法，其中在把重组核酸引入核中之前将第一个核酸与第二个核酸可操作地连接以形成重组核酸。