[发明专利]检测胰腺导管腺癌免疫组化标记蛋白组合的抗体组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物检测领域，涉及检测胰腺导管腺癌免疫组化标记蛋白组合的抗体组合物及其应用。

背景技术

胰腺癌是全世界最常见最严重的恶性肿瘤，被称为“癌症之王”，患者五年生存率不到1％，预后极差。胰腺血管、淋巴管丰富，腺泡无包膜，因此胰腺癌起病隐匿，发展快，极易发生转移。同时由于其生长无痛，并且现今没有特异度高的肿瘤标记物，影像学技术尚不能发现早期微小病灶，导致胰腺癌病人被确诊时通常已处于疾病晚期。胰腺癌发病部位中70％位于胰头、胰颈和钩突。肿瘤通常容易侵犯到周围结构，特别是周围的血管和神经，常累及门静脉、脾静脉和肠系膜上静脉，甚至肠系膜上动脉也有侵犯。只有20％的肿瘤局限于胰腺内，40％侵犯到周围组织，另40％已经有内脏器官转移，特别是肝脏。尽管近年来胰腺癌的切除率有提高，但是术后的生存率却没有明显改善。淋巴结是否转移和肿瘤是否根除是预后的决定因素。

肿瘤标记物是肿瘤组织或肿瘤细胞由于癌基因、抑癌基因或其它肿瘤相关基因及其编码产物异常表达所产生的生物活性物质。正常组织或良性病变时有一定程度表达但产量甚微，而肿瘤发生时则大幅上调。利用患者组织、体液或排泄物中存在肿瘤标记物的特点，临床实验室运用多种方法技术对其进行检测、分析和评估，便于肿瘤早期发现、诊治及随访。临床病理科常用的胰腺癌免疫组化标记物有CEA、CA19-9、p53、Ki-67和CK等。

癌胚抗原(CEA)是属于免疫球蛋白家族3的高分子量糖蛋白类，属于癌胚胎性抗原，只在胚胎期产生，其主要来源于胎儿的胃、肠道和血液。出生后，癌胚抗原的产生被抑制，在正常成人的肠道、胰腺和肝组织中也有少量存在。因此，在正常成人的血液中癌胚抗原很难被测出。此抗原表达于多种器官，包括胃、大肠、肺和胰腺。当这些器官发生炎性变或者坏死时，释放多量CEA使血中该物质水平超过参考值的上限。

CA19-9是在胃肠道癌中被发现的一种比CEA诊断胰腺癌更为特异的肿瘤标记物，并得到广泛使用。其用于诊断胰腺癌的敏感性和特异性分别达到80％和86％。由于非癌疾病情况也可致CA19-9水平升高而呈现假阳性，因此应将其和其他肿瘤标记物联合使用。

肿瘤抑制基因p53在人类癌中是最常见的突变基因，胰腺肿瘤细胞有50％～70％的突变率。p53基因的缺失或突变失活，在胰腺癌发展过程中起着重要的作用，但出现时间较晚。

细胞角蛋白(CK)是上皮细胞骨架的组成成分，也是上皮来源癌细胞中间丝的组成成分。它是上皮组织特有的成分而在其他组织细胞(如内皮细胞、淋巴细胞、纤维细胞等)中不存在。胰腺导管腺癌属于上皮来源的恶性肿瘤，因此，通过对胰腺疾病的患者进行CK检测来鉴别病灶中是否存在癌细胞。

正常的细胞需要有有丝分裂信号才能从静止期进展到增殖期。癌细胞往往缺少独立的外部生长刺激信号，却能发出自发性生长信号。Ki-67即是这样一种与自发性生长信号相关的胞核抗原，其存在于增殖细胞细胞周期中所有活跃期(G₁、s、G₂和M)，而不存在于静止期(G₀)。Ki-67指数可作为胰腺癌生存率的一个独立预测指标。

虽然上述标记物已广泛应用于胰腺疾病病理常规检测，但到目前为止，尚缺少针对胰腺导管腺癌的特异性病理诊断标记物，与胰腺癌中其他类别的鉴别诊断主要依靠技术员经验。并且，对患者预后的判断主要以组织周围淋巴结中是否出现异型细胞为标准，尚未有关于病灶早期微转移的灵敏标记物的报道。

发明内容

本发明的目的是针对上述不足，提供胰腺导管腺癌免疫组化检测组合物。

本发明的另一目的是提供所述组合物的应用。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

一种胰腺导管腺癌免疫组化标记蛋白组合，由TIMP1和CD82组成。

所述的TIMP1为基质金属蛋白酶组织抑制因子。所述的CD82又名KAI1，是tetraspanin家族成员之一。

检测所述的蛋白组合的抗体组合物，由TIMP1的单克隆抗体和CD82的单克隆抗体组成。

本发明所述的TIMP1的单克隆抗体和CD82的单克隆抗体即可以按照现有技术自行制备，也可以购买商业化的单克隆抗体成品。

所述的TIMP1的单克隆抗体优选美国Abcam公司生产的货号为ab109125的TIMP1兔单克隆抗体。

所述的CD82的单克隆抗体优选美国Santa Cruz公司生产的货号为sc-17752的CD82鼠单克隆抗体组成。