[发明专利]以三孢布拉氏霉菌菌丝体为原料制备β‑胡萝卜素的方法有效
| 申请号： | 201610649923.9 | 申请日： | 2016-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN106220541B | 公开（公告）日： | 2018-02-27 |
| 发明（设计）人： | 范超;吴文忠;李倩;张聚成 | 申请（专利权）人： | 大连医诺生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C07C403/24 | 分类号： | C07C403/24;C12P23/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 大连格智知识产权代理有限公司21238 | 代理人： | 刘晓琴,张亚男 |
| 地址： | 116600 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 三孢布拉氏 霉菌 菌丝体 原料 制备 胡萝卜素 方法 | ||
1.以三孢布拉氏霉菌菌丝体为原料制备β-胡萝卜素的方法，包括提取和重结晶工艺段，其特征在于，所述的重结晶工艺段采用两步重结晶法，包括下述步骤：
B1.将总提取液浓缩至β-胡萝卜素浓度为5500～6500mg/L，于0～7℃保温静置，然后过滤；
B2.将步骤B1所得滤液浓缩至β-胡萝卜素浓度为5500～6500mg/L，在10～15℃保温静置，然后过滤。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤B1和B2中，保温静置的时间分别是2～6小时和1～4小时。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的重结晶工艺段包括下述步骤：
B1.将总提取液浓缩至β-胡萝卜素浓度5500～6500mg/L，于0～7℃保温静置2～6小时，然后过滤；
B2.将步骤B1所得滤液浓缩至β-胡萝卜素浓度5500～6500mg/L，在10～15℃保温静置1～4小时，然后过滤；
B3.合并步骤B1和B2过滤所得的固形物，真空干燥得到β-胡萝卜素晶体。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的提取工艺段包括如下步骤：
A1.过滤三孢布拉氏霉菌发酵液，得湿菌丝体，并以乙酸乙酯清洗湿菌丝体；
A2.加入干菌丝体质量10～15倍的乙酸乙酯，机械剪切破壁，然后在30～60℃保温浸提，过滤得提取液i和滤渣；
A3.分两次向步骤A2所得滤渣中加入质量总计为干菌丝体质量15～20倍的乙酸乙酯，在30～60℃保温浸提，过滤得提取液ii和提取液iii；
A4.合并提取液i、ii和iii得总提取液。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
A1.过滤三孢布拉氏霉菌发酵液，得湿菌丝体，并以干菌丝体质量3～5倍的乙酸乙酯清洗湿菌丝体；
A2.加入干菌丝体质量10～15倍的乙酸乙酯，机械剪切破壁，然后在30～60℃保温浸提，过滤得提取液i和滤渣；
A3.分两次向所得滤渣中加入质量总计为干菌丝体质量15～20倍的乙酸乙酯，在30～60℃保温浸提，过滤得提取液ii和提取液iii；
A4.合并提取液i、ii和iii得总提取液；
B1.将总提取液浓缩至β-胡萝卜素浓度5500～6500mg/L，于0～7℃保温静置2～6小时，然后过滤；
B2.将步骤B1所得滤液浓缩至β-胡萝卜素浓度5500～6500mg/L，在10～15℃保温静置1～4小时，然后过滤；
B3.合并步骤B1和B2过滤所得的固形物，真空干燥得到β-胡萝卜素晶体。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤A2中对菌丝体进行机械剪切破壁的时间为0.1～2小时。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤A2和A3中每次保温浸提是在45～55℃条件下提取0.5～2小时。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤B3中所述的真空干燥是在35～45℃条件下真空干燥8～24小时。
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