[发明专利]具有增加的脂肪酶活性的两亲性肽‑脂肪酶缀合物及其用途

权利要求书

1.两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中两亲性肽与脂肪酶连接。

2.权利要求1所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述两亲性肽选自buforin IIb、B0、paracin I、NKC和NRC。

3.权利要求2所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述两亲性肽选自包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的buforin IIb，包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列的B0，包含SEQ ID NO：3的氨基酸序列的paracin I，包含SEQ ID NO：4的氨基酸序列的NKC，和包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的NRC。

4.权利要求1所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述脂肪酶是荧光假单胞菌来源的脂肪酶TliA(热稳定脂肪酶)或溶脂发光杆菌来源的脂肪酶M37。

5.权利要求4所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述TliA是包含SEQ ID NO：6的氨基酸序列的脂肪酶，且M37是包含SEQ ID NO：7的氨基酸序列的脂肪酶。

6.权利要求1所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述两亲性肽连接到所述脂肪酶的N-或C-末端，或两个两亲性肽分别连接到所述脂肪酶的N-和C-末端两端。

7.权利要求1所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述两亲性肽经由接头连接到所述脂肪酶。

8.权利要求7所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述接头是非肽基接头或肽基接头。

9.权利要求8所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，其中所述非肽基接头选自聚乙二醇均聚物、聚丙二醇均聚物、乙二醇-丙二醇共聚物、聚氧乙烯多元醇、聚乙烯醇、多糖、右旋糖酐、聚乙烯基乙醚、生物可降解聚合物、脂类聚合物、壳多糖、透明质酸和它们的组合。

10.权利要求1所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物，包含选自SEQ ID NO：8至17的氨基酸序列。

11.多核苷酸，编码权利要求1-10中任一项所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物。

12.权利要求11所述的多核苷酸，包含选自SEQ ID NO：45至74的核苷酸序列。

13.表达载体，包含权利要求11所述的多核苷酸。

14.转化体，其中包含权利要求13所述的表达载体。

15.制备两亲性肽-脂肪酶缀合物的方法，包括：

(a)培养权利要求14所述的转化体；以及

(b)从细胞培养物或培养基中回收所述两亲性肽-脂肪酶缀合物。

16.权利要求15所述的方法，其中所述缀合物包含选自SEQ ID NO：8至17的氨基酸序列。

17.脂解的方法，包括使权利要求1-10中任一项所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物与脂类底物反应。

18.生产生物柴油的方法，包括使权利要求1-10中任一项所述的两亲性肽-脂肪酶缀合物与脂肪和/或油以及醇一起反应。