[发明专利]一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法

说明书

本发明属于生物工程技术领域，为解决在利用三文鱼作为原料进行蛋白肽粉提取提纯过程中所存在的技术问题，本发明提供一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，该方法通过内切酶与外切酶的综合运用对酶解物进行二次酶解、三次过滤及静置措施，可使得到的蛋白肽粉完全满足医药级蛋白肽粉的指标要求，可以作为医用级蛋白胨、保健品级鱼蛋白粉和复合氨基酸粉的原料。

技术领域：

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种以三文鱼为原料生产医用级蛋白肽粉的方法。

技术背景：

蛋白肽粉不仅是发酵法制药行业使用培养基的重要氮营养源，也是食品和保健品添加以及复合氨基酸的重要原料。以往的医用级蛋白肽粉主要采用蛋白胨，以牛肉膏，鱼溶浆粉等为主，但以此作为氮营养源在菌种培养和产菌率等方面的指标均不能满足要求，并且蛋白胨杂质多，含有污染物和重金属，影响产品的医用安全。因此选择无污染及重金属含量低的原料成为提高蛋白胨品质的主要因素。在选择的过程中，由于海洋鱼类生活于深海之中，无人为生态环境污染，重金属含量低，且鱼体蛋白含量高，研究人员将目光逐渐锁定于海洋鱼类。经过比对，我们发现三文鱼测得的鱼皮蛋白含量在80%以上，三文鱼鱼肉蛋白含量高达17.2%、每100克鱼肉能力能量达到139大卡，综合比较各种鱼类的营养指标、保存难易、受污染的程度、对人体的危害等，我们得出深海冷水三文鱼明显优于其它鱼种如金枪鱼、鳕鱼、鳀鱼、带鱼、鲐鱼、鱿鱼，是很好的生产医药级蛋白肽粉的首选原料。

目前有关于利用鱼类作为原料进行提取鱼蛋白的报道。如申请号：201310096815X，一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法，其采用的方法是在经过预处理的鱼皮混合液加入复合蛋白酶进行酶解，复合蛋白酶选用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解酶、酸性蛋白酶和胃蛋白酶中两种，将得到的酶解液进行离心、超滤、浓缩、盐析而得。如申请号：2012102539328，一种鱼脑微胶囊的制备方法，其采用的方法在经过超声波处理的鱼脑均浆液中加入胰蛋白酶酶解后，灭酶，再加入胃蛋白酶酶解，获得酶解液，在酶解液中加入其它营养成分经过喷雾、干燥而得。申请号：2015101175690，一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源锌螯合胶原肽及其制备方法和用途，其方法是在经过处理制得的金枪鱼骨胶原蛋白料液中加入胃蛋白酶酶解，然后调整pH值，再加入胰蛋白酶酶解，得酶解产物，将酶解产物超滤、大孔树脂层析柱脱杂、乙醇洗脱、冷冻干燥而得。申请号：2004100356188，鱼蛋白生物肽肥料的制备方法，其方法在鲜鱼、鲜鱼皮或鲜鱼骨的下脚料中加入降解酶胰蛋白酶或胃蛋白酶进行降解，然后过滤，浓缩、灭菌。

虽然有上述关于鱼蛋白的提取工艺，但采用上述酶解工艺对三文鱼进行提取，酶解结果显示其水解度只能达到25-50%之间，水解程度较低，并且小肽分子量大于10000，蛋白肽呈现苦味，为消减苦味，目前常用的工艺是采用膜过滤，将10000以下的小肽分离出来，由此增加了分离难度、清洗膜的难度和污染。同时，三文鱼中的脂肪含量高达7.8%、胶质含量超过5%，酶解液不易分离和分层。采用常规的一步离心和膜分离相结合的方法无法将酶解液中的鱼油、胶质、脂和杂质彻底分离，也给膜分离带来了清洗的难度。另外酶解得物中游离氨基酸的含量过低，小于20%。上述酶解得物的指标远远达不到医药级蛋白肽粉的要求，因此有必要针对三文鱼的酶解工艺作进一步改进。

发明内容

为解决在利用三文鱼作为原料进行蛋白肽粉提取提纯过程中所存在的技术问题，本发明提供一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法。

为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案为：一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，其特征在于，该方法含有下列步骤：

S1、原料准备

选择新鲜的或冷冻的三文鱼或其加工后剩余的副产物，如三文鱼碎肉、鱼排和鱼皮作为原料，要求三文鱼及其加工剩余副产物等原料的挥发性盐基氮小于40，破碎为0.5-1.5cm的碎块，将原料投入到酶水解反应釜中，添加原料重量3-4倍的软水；

S2、第一步酶解