[发明专利]一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物及其制备和应用

说明书

本发明公开了一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物。其具有式I所示的结构式。含有多醚链二氢吡啶类衍生物在pH值4‑9条件下，与一氧化氮反应，得到吡啶衍生物，在紫外光照射下产生荧光，可定量检测，具有检测快速、高效、灵敏、化学性质稳定等优点。

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物及其制备和应用。

背景技术

一氧化氮是生物体内一种重要的信使分子，参与体内多种生命活动。1987年，科学家研究发现一氧化氮是内皮衍生松弛因子，在心血管系统中起着调控血管松弛的作用。已有证据显示，一氧化氮在生物体的其他系统中也发挥着重要的作用，比如其在大脑中起着信号传导的作用，在免疫系统中具有防御细菌攻击和防止感染等作用。因此，一氧化氮成为生物学、医学、药理学等领域研究的热点之一。一氧化氮是一种气体自由基，在生物体内极不稳定，使得生物体内一氧化氮的检测方法成为相关领域的研究热点和难点，因而，建立一种快速、高效、准确、灵敏的一氧化氮检测方法尤为重要。

荧光光度法检测一氧化氮主要是基于荧光探针与一氧化氮的特异性反应，生成强荧光的物质。目前应用最为广泛的一氧化氮荧光探针是邻苯二胺类，但其稳定性差，使其应用受到限制。本领域技术人员仍致力于开发一种检测快速、高效、灵敏的一氧化氮荧光探针。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物。

本发明的目的还在于提供上述含有多醚链二氢吡啶类衍生物的制备方法及其在制备荧光探针中的应用。

一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物，具有式I所示的结构式：

式中，R为甲基，乙基，异丙基或丙基；R’为甲基，乙基，异丙基或丙基；n＝2-6。

优选的，所述含有多醚链二氢吡啶类衍生物如式Ⅱ所所示：

制备上述含有多醚链二氢吡啶类衍生物的方法，按照如下步骤进行：

1)以7-羟基-4-甲基香豆素为起始原料，在7-位引入甲基；

2)将4-位氧化成醛；

3)利用Hantzsch反应引入1,4-二氢吡啶结构单元。

以式Ⅱ化合物为例，其合成路线为：

上述含有多醚链二氢吡啶类衍生物在制备一氧化氮检测荧光探针中的应用，其特征在于，所述含有多醚链二氢吡啶类衍生物在pH值4-9条件下，与一氧化氮反应，得到吡啶衍生物，在紫外光照射下产生荧光。

所述反应是在溶剂中进行，所述溶剂选自二甲基亚砜、二氯甲烷、乙醇、甲醇、乙腈中的一种。

合成得到的4d与一氧化氮的反应为：

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明的含有多醚链二氢吡啶类衍生物，与一氧化氮反应，生成荧光物质，在紫外线照射下可定量检测，具有检测快速、高效、灵敏、化学性质稳定等优点。

附图说明

图1为化合物4d与NO作用前后的紫外吸收光谱(c＝5μM)。

图2为化合物4d与NO作用前后的荧光光谱(c＝5μM)。

图3为化合物4d细胞内NO的细胞显像实验：明场(上)，对应的荧光(下)(左)细胞在含有探针的培养基培养8h(右)细胞先在LPS的培养基先培养4h，后加入探针培养8h。

图4为化合物4d及其与NO作用后产物4e对RAW264.7细胞MTT实验。