[发明专利]检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型及构建

权利要求书

1.一种检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型，其特征在于，包括所述阿尔茨海默病相关代谢小分子、所述阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振波谱检测条件和判断公式；所述阿尔茨海默病相关代谢小分子包括：次黄嘌呤、甲醇、乙醇；所述阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振波谱检测条件是使用CPMG序列采集小分子信息，谱宽为15～25ppm，等待时间为1～3s，90°脉宽为10～12μs，采样点数为28～34K，FID累加次数为60～68次，回波演化时间为300～400us，回波循环为90～110，总回波时间为60～80ms；

所述判断公式是Y＝Xi×Fi+C

其中，Y为是否具有阿尔茨海默病的判别指标，取值0或1，0表示未患病，1表示阿尔茨海默病患者；Xi为通过核磁共振波谱检查到的所述阿尔茨海默病相关代谢小分子的浓度；Fi为系数，Fi＝{0.064，0.469，0.025}，Fi对应的小分子分别为次黄嘌呤、乙醇和甲醇；C为常量-0.438。

2.如权利要求1所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型，其特征在于，所述阿尔茨海默病相关代谢小分子是次黄嘌呤、甲醇、乙醇；所述阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振波谱检测条件是使用CPMG序列采集小分子信息，谱宽为20ppm，等待时间为2s，90°脉宽为11.6μs，采样点数为32K，FID累加次数为64次,回波演化时间为350us，回波循环为100，总回波时间为70ms。

3.一种如权利要求1或2所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：收集多例阿尔茨海默病患者血清和健康人的血清分别作为病例组和对照组血清样本，进行低温冷冻备用；

步骤二：对所述血清样本进行核磁共振波谱前预处理；

步骤三：对预处理过的两组血清样本进行核磁共振波谱检测，并收集数据；

步骤四：对于核磁共振波谱检测到的代谢小分子，使用百分比差异度进行评估，找出百分比差异度得分最大的代谢小分子；

步骤五：应用Mann-Whitney U test检验方法对核磁共振波谱检测到的代谢小分子进行差异性检验，选择假设检验P值小于0.05，FC值大于2，且与糖酵解代谢无关的差异代谢小分子，所述差异代谢小分子在病例组中表达量显著高于在对照组中的表达量，确定所述差异代谢小分子即所述阿尔茨海默病相关代谢小分子；

步骤六：使用多远线性逻辑回归的方法，对于每一个所述阿尔茨海默病相关代谢小分子，将其作为自变量Xi，将是否具有阿尔茨海默病作为因变量Y，构建所述判断公式，从而得到所述检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型。

4.如权利要求3所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型的构建方法，其特征在于，所述步骤一中病例组和对照组血清样本的获得是通过将从所述病例组和所述对照组取得的全血样本离心，去血细胞，保留血清，得到的。

5.如权利要求4所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型的构建方法，其特征在于，所述步骤一中低温冷冻前先将得到的所述血清样本以1倍到5倍体积的生理盐水稀释。

6.如权利要求3所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型的构建方法，其特征在于，所述步骤二中的预处理包括将所述血清样本与Na+/K+缓冲液混匀后离心取上清液，以备核磁共振波谱检测用。

7.一种如权利要求1或2所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型在筛选抗阿尔茨海默病药物中的应用。

8.一种如权利要求1或2所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型的准确性判断方法，其特征在于，使用ROC曲线的方法验证阿尔茨海默病诊断的准确性，其方法是：

1)利用判断公式Y＝Xi×Fi+C对阿尔茨海默病患者和对照人群的测定结果来计算截断点，所述截断点为准确率达到最大时的测定值；

2)计算出所有所述截断点的敏感性、特异性和准确率；

3)以敏感性为纵坐标代表真阳性率，1-特异性为横坐标代表假阳性率，作图绘成ROC曲线，合并所述阿尔茨海默病相关代谢小分子对应的ROC曲线，得出阿尔茨海默病诊断的准确率、敏感度和特异度。

9.如权利要求8所述的检测阿尔茨海默病相关代谢小分子的核磁共振模型的准确性判断方法，其特征在于，所述测定结果包括测定值的上下限、组距。