[发明专利]一种黑果腺肋花楸开放式组织培养快速育苗方法

权利要求书

1.一种黑果腺肋花楸开放式组织培养快速育苗方法，其特征是，将外植体消毒处理接种后，按如下步骤进行：

(1)分化培养

分化培养基为：改良WPM+0.02mg/L NAA+1mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉；培养条件：温度25℃±3℃，湿度25％-50％，光照强度3000lx-6000lx，光照时间10h-12h；培养时间为15-20天；

所述改良WPM配方为：硝酸钾190mg/L，硝酸铵400mg/L，磷酸二氢钾170mg/L，硫酸镁370mg/L，四水合硝酸钙684mg/L，硼酸6.2mg/L，四水合硫酸锰22.3mg/L，七水合硫酸锌8.6mg/L，二水合钼酸钠0.25mg/L，五水合硫酸铜0.25mg/L，C₁₀H₁₃FeN₂NaO₈ 73.4mg/L，肌醇100mg/L,甘氨酸2mg/L,VB₁0.1mg/L,VB₆0.5mg/L,烟酸0.5mg/L；

(2)继代培养

培养基配方、培养条件及培养时间与步骤(1)分化培养相同；

(3)扩繁培养

扩繁培养基为：改良WPM+0.02mg/L NAA+1mg/L 6-BA+300mg/L核黄素+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉；培养条件：温度25℃±3℃，湿度25％-50％，光照强度3000lx-6000lx，光照时间10h-12h；培养时间为15-20天；

所述改良WPM配方与步骤(1)分化培养基中相同；

(4)生根培养

生根培养基为：1/2MS+0.5mg/L IBA+0.11mg/L GA+300mg/L核黄素+1ml/L抑菌剂Ⅰ+1.5ml/L抑菌剂Ⅱ+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉；

所述抑菌剂Ⅰ：1.5％益培隆和2.5％氯霉素各取1ml配制成1升抑菌剂Ⅰ；

所述抑菌剂Ⅱ：取对羟基苯甲酸乙酯20g，山梨酸钠15g，一水合柠檬酸三钾10g，配制成1升抑菌剂Ⅱ；

培养条件：温度25℃±3℃，湿度25％-50％，光照强度3000lx-6000lx，光照时间10h-12h，培养时间为15-18天；

所述步骤(3)扩繁培养后，将长势相对较弱的幼苗转到壮苗培养基中，进行壮苗培养；

壮苗培养基为：改良WPM+0.2mg/L IAA+0.5mg/L GA+300mg/L核黄素+30g/L蔗糖+6g/L琼脂粉；培养条件：温度25℃±3℃，湿度25％-50％，光照强度3000lx-6000lx，光照时间10h-12h,培养时间15-20天；

所述改良WPM配方与步骤(1)分化培养基中相同。

2.如权利要求1所述黑果腺肋花楸开放式组织培养快速育苗方法，其特征是，所述各培养基的pH值为5.8。

3.如权利要求1或2所述黑果腺肋花楸开放式组织培养快速育苗方法，其特征是，所述步骤(4)生根培养，将配制好的生根培养基不经过高温高压灭菌，直接倒入800ml一次性圆型透明餐盒中，等培养基冷却凝固后即可进行接种，每盒接种40颗。