[发明专利]一种基于STIM1基因检测人细胞内钙内流（SOCE）水平的方法及其专用试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于STIM1基因检测人细胞内钙内流(SOCE)水平的方法及其专用试剂盒。本发明不仅为进一步研究SNP与疾病易感基因的相关性、SNP与个体对药物敏感或耐受的相关性研究等奠定基础，也为研究突变型STIM1与野生型STIM1所介导的钙内流之间的差异，从而探索STIM1蛋白结构变化所引起的功能变化提供基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于STIM1基因检测人细胞内钙内流(SOCE)的方法及其专用试剂盒。

背景技术

细胞信号转导通路(cellular signal transduction pathway)是指细胞接受外界信号，通过一整套特定的机制，将胞外信号转导为胞内信号，最终调节特定基因表达，并引起细胞的应答反应。钙离子是生物体中最重要的信号分子之一，它参与了如基因转录，肌肉收缩、分泌、能量代谢，细胞增殖、分化、凋亡等所有的细胞生命活动。

钙离子作为细胞内信号分子，静息状态时，通过调控钙离子的内流和外排，细胞内钙离子调控系统将其浓度维持在一个极低的水平，但当细胞受到胞外信号刺激，会使胞内钙离子浓度瞬时提高到一个很高的水平，从而发挥信号功能。钙库调控的钙离子通道(store-operated calcium channel，SOCC)是非兴奋性细胞钙离子内流最主要的通道，当细胞内钙库储存的钙离子被释放之后，能够快速活化质膜上的通道，从而使钙库充满，以及维持胞浆内高的钙离子浓度激活的信号；钙库调控的钙离子内流 (store-operatedcalcium entry，SOCE)参与调节很多生命过程，比如cAMP的产生， T淋巴细胞的活化等，一旦SOCE被破坏，将会引起许多疾病，如免疫缺陷，癌症等。

目前，钙库调控钙内流过程中两个重要蛋白分子被确定为：STIM1(stromalinteraction molecule 1)和Orai1(calcium release-activated calcium channelprotein 1)。它们对SOCC的调控起主要作用，STIM 1主要激活通道，Orai1蛋白是构成SOCC通道蛋白的主要亚基。STIM1是细胞内质网钙库消耗后的感受蛋白，而Orai1是细胞膜表面上的钙离子通道蛋白。当钙库清空后，STIM1感受钙库清空状态，聚集并向细胞膜靠近，通过与细胞膜上的Orai1相互作用来开放钙通道，形成SOCE进而参与细胞信号的传递，影响细胞多种重要功能。

单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms，SNP)作为人类可遗传变异中最常见的一种，用于阐释并寻找某种基因变异与表型之间的相关性。单核苷酸多态性是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的序列多态性，在人类基因组中广泛存在，占所有已知多态性的90％以上。开展STIM1基因的SNP研究可以揭示人种、人群和个体间DNA序列的差异，从而在疾病的诊断、预防和个性化治疗中发挥关键作用，具有重要的研究价值。

发明内容

本发明的第一个目的是提供检测STIM1基因第7外显子自5’端起第71位脱氧核糖核苷酸的物质的新用途。

本发明提供了检测STIM1基因第7外显子自5’端起第71位脱氧核糖核苷酸的物质在鉴定STIM1基因的基因型中的应用；

所述STIM1基因的基因型为AA基因型或GG基因型或GA基因型；

所述AA基因型为STIM1基因第7外显子第71位脱氧核糖核苷酸为AA的纯合体；

所述GG基因型为STIM1基因第7外显子第71位脱氧核糖核苷酸为GG的纯合体；

所述GA基因型为STIM1基因第7外显子第71位脱氧核糖核苷酸为G和A的杂合体。

本发明的第二个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定STIM1基因的基因型的方法。