[发明专利]一种配体修饰的肌醇‑聚乙烯亚胺基因载体的制备方法及其应用在审
申请号: | 201610722681.1 | 申请日: | 2016-08-25 |
公开(公告)号: | CN107778481A | 公开(公告)日: | 2018-03-09 |
发明(设计)人: | 姚宏;刘玲;刘毅;刘倩 | 申请(专利权)人: | 徐州医科大学 |
主分类号: | C08G73/04 | 分类号: | C08G73/04;C12N15/87 |
代理公司: | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司11108 | 代理人: | 张洪年 |
地址: | 221002 江苏省徐州市淮海*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 修饰 聚乙烯 亚胺 基因 载体 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种肌醇-聚乙烯亚胺基因载体的制备方法,其特征在于,其具体操作步骤为:将肌醇、N,N’-羰基二咪唑、催化剂溶于溶剂中,室温搅拌活化1-48h,然后滴入聚乙烯亚胺溶液中,室温搅拌过夜,透析,冷冻干燥,得到白色絮状的肌醇-聚乙烯亚胺基因载体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述聚乙烯亚胺为分子量在600D-25KD范围内的线状或枝状聚乙烯亚胺。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述肌醇与聚乙烯亚胺的摩尔比为1:1-1:6;所述N,N’-羰基二咪唑与聚乙烯亚胺的摩尔比为1:1-1:12。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述催化剂为有机碱,具体选自二乙胺,三乙胺,乙二胺,吡啶中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法中采用的溶剂为DMSO,水,乙醇,DMF,THF。
6.一种配体修饰的肌醇-聚乙烯亚胺基因载体的制备方法,其特征在于,其具体操作步骤为:将配体溶于水中,加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺,室温反应0.5-3h,然后滴入肌醇-聚乙烯亚胺基因载体溶液中,室温反应过夜,透析,冷冻干燥,得到白色絮状的配体修饰的肌醇-聚乙烯亚胺基因载体。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述配体为乳糖、半乳糖、甘露糖、多肽、蛋白质、抗体及其衍生物。
8.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述配体与肌醇-聚乙烯亚胺基因载体的摩尔比为0.2:1-2:1;所述配体与1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的摩尔比为1:1-1:10;所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐与N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为5:1-1:5。
9.根据权利要求6-8所述方法制备得到的配体修饰的肌醇-聚乙烯亚胺基因载体与DNA或RNA组成的复合物。
10.根据权利要求9所述的配体修饰的肌醇-聚乙烯亚胺基因载体与DNA或RNA组成的复合物,其特征在于,所述的DNA包括报告基因、抗癌基因和/或细胞因子基因,所述的RNA包含iRNA,miRNA。
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