[发明专利]一种提纯棘白菌素 B 母核的方法

说明书

本发明公开了一种提纯棘白菌素B母核的方法，包括以下步骤：1)转化液固液分离；2)浓缩，将步骤1)所得液体去除水分；3)结晶；4)晶体分离。本方法使用的结晶法，操作简便，节省时间，成本低，适合于各种规模的连续生产；结晶得到的产品纯度高；采用的非极性溶剂易于回收重新利用，节约成本。

技术领域

本发明属于药物合成领域，具体涉及一种提纯棘白菌素B母核的方法。

背景技术

真菌感染是一种广泛存在的威胁人类健康的疾病，多为浅表性感染，发生于粘膜上皮组织。深度真菌感染则一般发生于免疫抑制人群，随着器官移植手术及免疫抑制剂的使用、开放式外科手术及抗生素的滥用、人获得性免疫缺陷病的传播等，其发病率和致死率都不断上升。抗真菌药物的研究也成为了药物研究的热点之一，获得了越来越多的关注。

棘白菌素是一类天然的抗真菌物质，是20世纪70年代发现的一组天然产物，由环状多肽核心和脂肪酸侧链组成。其作用机制是通过抑制β-(1，3)-D-葡聚糖的合成，导致细胞壁的不稳定和真菌细胞内容物外流发挥其抗真菌作用。由于动物细胞没有细胞壁，棘白菌素类的作用机制决定了其不良发应率低，具有抗菌谱广、活性强的特点，是治疗真菌感染的重要选择药物。棘白菌素类抗生素主要有B，C和D三种类型，其中棘白菌素B(Echinocandin B，简称为ECB)是最主要的类型，但是由于酰基侧链的存在具有一定的溶血毒性。将ECB侧链替换后可以获得多种药物，包括卡帕芬净、米卡芬净、阿尼芬净等。

阿尼芬净是ECB经犹他游动菌的酰化酶脱去侧链得到棘白菌素B母核(Echinocandin B Nucleus，简称为ECBN)，然后添加侧链后得到。

发明内容

本发明提供了一种提纯棘白菌素B母核的方法，其工艺简单、便于操作、产品纯度高，特别适合于连续化的大规模工业生产，具有良好的商业应用价值。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种提纯棘白菌素B母核的方法，具体包括如下步骤：

1)转化液固液分离；

2)浓缩，将步骤1)所得液体去除水分；

3)结晶；

4)晶体分离。

优选地，包括如下步骤：

1)转化液分离：将含棘白菌素B母核的转化液用微滤法实现固液分离；固液分离后，通过水洗将附着于固体上的棘白菌素B母核清洗至水相中；

2)浓缩：将步骤1)所得液体用纳滤法除去多余的水分，至可以结晶的浓度；

3)结晶：在步骤2)所得浓缩液调节pH值后加入非极性的有机溶剂，使棘白菌素B母核析出结晶；

4)晶体分离：将步骤3)的混悬体系用离心机离心，除去液相，得到棘白菌素B母核，通风橱中空气吹干得到干燥晶体。

优选地，所述步骤1)，水洗至液体电导率小于100μs。

优选地，所述步骤2)，浓缩除去多余水分，使棘白菌素B母核的浓度达到≥20g/L。

优选地，所述步骤2)，浓缩后棘白菌素B母核的浓度应达到30-35g/L。

优选地，所述步骤3)，结晶所用有机溶剂为丙酮、四氢呋喃、乙腈、正丁醇、二氯甲烷中的一种或几种。

优选地，所述步骤3)，结晶调整浓缩液pH值所用酸为乙酸、盐酸或者磷酸。

优选地，所述步骤3)，结晶调节pH值至3.5。

优选地，所述步骤3)，结晶所用有机溶剂为丙酮，调pH值所用酸为乙酸。