[发明专利]一种妇女痛经颗粒指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种妇女痛经颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于：妇女痛经颗粒用甲醇超声提取，滤过，取滤液测试；以延胡索乙素、丹酚酸B为对照品，用甲醇溶解，照高效液相色谱法建立指纹图谱；高效液相色谱法的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料；以甲醇-乙腈为流动相A，甲醇：乙腈1：1，以0.1%磷酸水溶液为流动相B，用三乙胺调pH值=6.0；检测波长260～300nm；柱温为15～35℃ ；流速0.5～1.5ml/min；洗脱方法为梯度洗脱，梯度洗脱的时间程序及其流动相的体积变化按如下设置进行：

时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）

0 1090

5 1585

202575

404060

505545

706040

807030

100 7030。

2.根据权利要求1 所述的一种妇女痛经颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于：

（a）供试品溶液的制备：取妇女痛经颗粒5袋，充分研细，取1.5～2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，称定重量，超声20～40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤纸滤过，取续滤液用微孔滤膜滤过，即得为供试品溶液；

（b）对照品溶液的制备：取延胡索乙素对照品、丹酚酸B对照品适量，加甲醇制成每1ml含延胡索乙素0.05mg和丹酚酸B 0.10mg的混合溶液，即得；

（c）色谱条件：C18色谱柱，以甲醇-乙腈为流动相A，甲醇：乙腈1：1，以0.1%磷酸水溶液为流动相B，用三乙胺调pH值=6.0；梯度洗脱，流速0.5～1.5ml/min，柱温25～35℃，检测波长：280nm；

（d）测定：精密吸取供试品溶液、对照品溶液各5～15μl，分别注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到妇女痛经颗粒的指纹图谱。

3.根据权利要求2所述的一种妇女痛经颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述微孔滤膜是用0.45μm的微孔滤膜。

4.根据权利要求2所述的一种妇女痛经颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述妇女痛经颗粒指纹图谱中有9个特征共有峰，图谱总长度为100min。

5.根据权利要求2所述的一种妇女痛经颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于：使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004年A版相似度软件对所述指纹图谱进行相似度评价，其相似度应大于0.95；指纹图谱相似度计算参数设置为：时间宽度为0.5秒；校正方式采用多点校正，校正色谱峰的匹配点为共有峰。