[发明专利]一种阻断帕金森患者淋巴细胞周期的药物及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，涉及一种运用脐血源神经干细胞和环孢素A以及维生素B₁₂复合药阻断人类发散性帕金森疾病淋巴细胞的细胞周期应用。

背景技术

大约90 %的帕金森患者属于散发性帕金森，平均年龄大约60岁，持续15年左右。到目前为止，治疗帕金森疾病的临床措施主要是对症治疗------用左旋多巴或多巴胺激动剂补充脑部缺失的多巴胺，然而，长期的多巴胺替代药物疗法却极易引发患者的副作用，例如：动作迟缓。可以说，能够用于临床上治疗帕金森的药物是极其有限，而且药效也不是很理想，只能稍微缓解帕金森患者的初期症状，不能完全阻止疾病的进展，临床的治愈可能几乎为零。因此，开发新的神经保护药物用于阻断或减缓帕金森疾病进程就显得至关重要，我们把目光放在脐血源神经干细胞药物上。

脐血源神经干细胞用于治疗人类帕金森疾病是非常有前景的，这属于一种利用细胞疗法对人类神经退行性疾病的治疗方案。脐血因其具有胚胎细胞的特性，所以它可以分化成神经干细胞。脐带血多能干细胞是一种发现较晚的一类脐带血干细胞。脐血源神经干细胞与其他来源的干细胞相比具有独特的优势：首先，来源充足，易于分离，纯度高，无肿瘤细胞污染，并且具有很强的增殖能力；其次，不涉及伦理道德问题，易于产业化制备；再次，对捐赠者无任何危害和损伤；最后，避免像其它来源的神经干细胞移植那样产生异体的免疫反应，也就是我们常说的移植物抗宿主反应。

帕金森患者的发病机理是由于体内纹状体和黒质部位严重缺少多巴胺能神经元，试想如果能够适时适量补给机体损失的细胞，一定就会对病情起到缓解乃至达到治愈的作用。细胞疗法是指用细胞或组织移植来达到治疗损伤机体的目的，该方法安全可靠。脐血源神经干细胞作为一类具有多分化潜能和自我更新能力的细胞，一旦植入帕金森患者体内，就能够在损伤区域分化为具有修复功能的多巴胺能神经细胞，并与宿主神经进行有机整合，逐步恢复损伤的神经功能。未分化的脐血源神经干细胞主要是利用本身的环境富集作用，在帕金森疾病发生的相应部位起到消除有毒物质，进而进行脑损伤组织的修复再生，以此创建辅助的神经网络。细胞疗法用于帕金森疾病的治疗将会是一种有效的治疗手段。

发明内容

本发明的目的是弥补现有药物治疗手段的不足之处，脐血源神经干细胞和环孢素A以及VB12复合药具有阻断发散性帕金森患者淋巴细胞的细胞周期的活性，具有广泛的应用前景，可能成为临床上治疗帕金森疾病的潜在治疗手段。

本发明的技术方案是：一种阻断帕金森患者淋巴细胞周期的药物，其特征在于：由以下组分组成，1X10⁶细胞/ml脐血源神经干细胞和20-60ng/ml环孢素A以及2-10 ng/ml 维生素B₁₂。

本发明由以下组分组成，1X10⁶细胞/ml脐血源神经干细胞和50ng/ml环孢素A以及4ng/ml 维生素B₁₂。

本发明由以下步骤组成，淋巴细胞接种于含有10 %胎牛血清的DMEM培养基，置于37 ℃，5 ％ CO₂培养箱中悬浮培养；待淋巴细胞生长到70-80 %，用1X10⁶/ml脐血源神经干细胞和50 ng/ml环孢素A以及4 ng/ml维生素B₁₂培养24 h即可。

DMEM培养基是 dulbecco's modified eagle medium的缩写；

DMEM的特性：

(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等;

(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;

(3)含有糖酵解途径中的重要物质------丙酮酸;

(4)含有微量的铁离子。

环孢素A是由11个氨基酸组成的环状多肽类物质，它是一种选择性作用于机体T淋巴细胞的强效免疫抑制剂，临床上主要用于肝、肾以及心脏移植的抗排异反应，也可与肾上腺皮质激素同用，治疗患者的免疫系统疾病。维生素B12（VB12）为B族维生素之一，是一类含钴的复杂有机化合物。VB12是神经系统功能健全不可缺少的维生素，参与神经组织中一种脂蛋白的形成，当机体内缺乏VB12时，可引起神经障碍，脊髓变性以及周围神经炎，临床表现有患者的情绪异常，表情呆滞以及反应迟钝等等。