[发明专利]猪圆环病毒II型口服病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌，其特征在于，由重组载体转化马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株所构建，其中，所述重组载体通过将编码猪圆环病毒II型衣壳蛋白的核苷酸插入到马克斯克鲁维酵母表达载体所构建，其中，所述马克斯克鲁维酵母表达载体包括马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子基因序列、马克斯克鲁维酵母菊粉酶终止子基因序列，所述马克斯克鲁维酵母表达载体的核苷酸序列为SEQ ID No.6。

2.根据权利要求1所述的重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌，其特征在于，所述猪圆环病毒II型衣壳蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1或2所示。

3.根据权利要求1所述的重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌，其特征在于，所述马克斯克鲁维酵母的营养缺陷型菌株为CGMCC No.10621。

4.一种猪圆环病毒II型病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，步骤包括：

权利要求1所述重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌培养发酵，在细胞内组装成猪圆环病毒II型病毒样颗粒；

收集培养发酵的菌，或者将收集的菌破碎。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，还包括如下构建所述重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌的步骤：

将编码猪圆环病毒II型衣壳蛋白的核苷酸插入到马克斯克鲁维酵母表达载体，构建重组载体，将所述重组载体转化马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株，构建得到所述的重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，根据马克斯克鲁维酵母的密码子偏好性，在保证编码猪圆环病毒II型衣壳蛋白序列相同的条件下进行密码子优化。

7.一种权利要求3所述重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌、或由权利要求4所述方法制备的猪圆环病毒II型病毒样颗粒的应用，其特征在于，用于制备预防和/或治疗猪圆环病毒II型病毒引发的疾病的药物。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用选自用作口服疫苗、作为饲料添加剂、饮用水添加剂中的任意一种或几种。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述猪圆环病毒II型病毒引发的疾病选自断奶仔猪多系统衰竭综合症、猪皮炎肾病综合症、仔猪先天性震颤和母猪繁殖障碍中的任意一种或几种。

10.一种制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗的方法，其特征在于，步骤包括：

以权利要求4中所收集的培养发酵的菌体、或权利要求4中收集菌体步骤后破裂后获得的病毒样颗粒，作为活性成分或作为活性成分之一，制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，收集菌体后，直接破壁，所得产物作为口服疫苗。

12.一种预防和/或治疗猪圆环病毒II型病毒引发的疾病的口服药物，其特征在于，包括按权利要求4所述方法制备的猪圆环病毒II型病毒样颗粒。