[发明专利]一种金线莲组培方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养方法，具体涉及一种金线莲组培方法。

背景技术

金线莲，又称金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。主要分布在我国的福建、台湾、广西、广东等地。具有清热凉血，除湿解毒，平衡阴阳、扶正固本，阴阳互补、生津养颜、调和气血、五脏、养寿延年等功用。主要用于治疗肺热咳嗽，肺结核咯血，尿血，小儿惊风，破伤风，肾炎水肿，风湿痹痛，跌打损伤，毒蛇咬伤、支气管炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、急慢性肝炎、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症，目前主要作为煲汤、茶饮等保健食品材料使用。

由于金线莲疗效确切，利用价值高，经济效益好，所以近年来金线莲的野生资源被疯狂采挖，到目前为止，野生金线莲资源已经基本绝迹。但在自然条件下，金线莲的资源更新非常缓慢，无法满足市场的需要。而且金线莲种子不具胚乳，无发芽能力，只有在真菌共生下，才促进种子萌发生长，但发芽率非常低。虽然还可以通过分根法式扦插方式繁殖，则所需时间很长，而且繁殖倍率也不高，生产上难以实现大面积栽培。采用生物技术组织培养技术，可以有效快速地提高金线莲种苗的繁殖速度和质量，实现金线莲优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金线莲组培方法，采用生物技术组织培养技术，可以有效快速地提高金线莲种苗的繁殖速度和质量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种金线莲组培方法，包括如下：

（1）选择野生金线莲茎段或茎尖为种源，使用10-20wt.%的乐果乳剂稀释600-700倍液浸泡15-30min，取出后，放入超净工作台使用5-6wt%的复合维生素溶液浸泡10-20min，再用0.05%的氯化汞溶液消毒3-5min，无菌水清晰3-5次，用滤水纸吸干水分备用；

（2）将步骤（1）获得的金线莲茎段或茎尖接种于诱导培养基中进行诱导培养，在17-20℃下培养5-10天，光照强度为300-1000LX，避免直射，光照时间为2-3h/天；

（3）将步骤（2）培养获得的不定芽切成具有1-3个不定芽的小块，接种在增殖培养基上，20-25天转接一次；培养温度为15-20℃，光照强度为300-1000LX，避免直射，光照时间为2-3h/天；

（4）当苗长到2-4cm时，将苗切成单株，接种到生根培养基上，培养20-25天，光照强度为500-1500LX，避免直射，光照时间为3-5h/天，培养温度为15-20℃；

（5）选取具叶4-5张、发根3-5条的苗，进行移栽，移栽至有遮阴棚的基质中栽培，温度为20-23℃，相对湿度为80-90%，自然散色光，基质要求疏松透气。

所述的诱导培养基为MS+芸苔素0.1-0.3mg/L+DA-6 0.2-0.5mg/L+激动素0.1-0.4mg/L，pH5.5-6.0。

所述的增殖培养基为MS+6-BA 0.1-0.3mg/L+多效唑0.05-0.1mg/L+椰子汁 2-5g/L+蔗糖10-15g/L+琼脂粉2-3g/L，pH5.0-5.3。

所述的生根培养基为1/2MS+萘乙酸 0.1-0.3mg/L+赖氨酸10-15g/L+赤霉素0.1-0.4mg/L+琼脂10-20g/L+西红柿汁5-10g/L+白糖2-4g/L，pH5.3-5.5。

所述基质由以下重量份原料组成：麸皮6-10份、红糖1-3份、草木灰5-10份、腐殖土3-8份、田园土10-15份、苹果渣5-9份、山竹壳2-6份、杏鲍菇菌渣6-11份。按常规方法制备。

本发明的优点在于：

1．本发明选用野生金线莲茎段或茎尖作为培养对象，成活率高，不定芽增殖率高。

2．在基质中加入麸皮、红糖、草木灰、腐殖土、田园土、苹果渣、山竹壳、杏鲍菇菌渣等成分对于促进幼苗生长非常有利，叶片净增量、发根数和鲜重净增量高。

3．经过组培试验，增殖率可达6倍以上，成活率达百分百。

具体实施方式

实施例1

一种金线莲组培方法，包括如下：

（1）选择野生金线莲茎段或茎尖为种源，使用15wt.%的乐果乳剂稀释650倍液浸泡25min，取出后，放入超净工作台使用6wt%的复合维生素溶液浸泡15min，再用0.05%的氯化汞溶液消毒4min，无菌水清晰4次，用滤水纸吸干水分备用；