[发明专利]利用多酚类化合物在材料表面实现血小板图案化的方法

说明书

本发明提供了一种利用多酚类化合物在材料表面实现血小板图案化的方法。本发明利用多酚类化合物与金属离子的螯合作用制备多酚‑金属离子的混合溶液，将此溶液滴加到具有微型图案的印章表面，得到多酚材料的图案印章，最后用多酚材料的图案印章对目标材料进行微接触印刷，得到图案化的多酚材料表面。当图案化的多酚材料表面与血小板接触之后，血小板选择性的粘附在未被多酚材料覆盖的区域，从而实现对血小板的图案化调控。本发明的方法，无需引入亲水高分子和生物活性蛋白，且具有成本低廉、操作简便的特点。所制备的血小板图案化表面有望用于血小板粘附检测、抗血小板药物治疗和评估等领域。

技术领域

本发明涉及生物材料表面修饰技术和表面微型图案制备技术，特别涉及在材料表面调控血小板粘附行为的技术。

背景技术

血小板是由骨髓中巨核细胞产生的具有生物活性的小块细胞质，在生理情况下血小板发挥黏附、聚集等功能保证正常止血过程顺利进行，同时血小板粘附还与病理性血栓形成、肿瘤转移、炎症及免疫反应等相关。因此在临床上常需要对功能正常或异常血小板的粘附性能进行检测，然而在体外的研究中，血小板的粘附行为受到诸多因素的影响，如空间几何构型的限制，血小板与基底的相互作用以及血小板之间的相互作用等。因而目前临床对血小板粘附的检测还无法有效的评估。构建图案化的表面可以在限定的空间范围内有效控制血小板的粘附，从而对血小板的粘附激活机理进行研究以及对病变的血小板和抗血小板药物进行有效的检测。如文献Anal.Chem.2013,85,6497-6504中，Ana Lopez-Alonso等人利用构建的血小板图案化表面实现了血小板粘附功能的检测，并对抗血小板药物进行了有效评估。

目前，在材料表面实现血小板图案化的方法主要依赖于化学图案的构建和微纳加工技术(如微接触印刷术、光刻术等)。其中最常见的策略是首先在目标材料表面修饰一层惰性的亲水表面(如聚乙烯醇、两亲性高分子等)用于排斥血小板粘附，然后在惰性表面引入生物活性蛋白(如纤维蛋白原、纤粘蛋白等)来引导血小板的粘附。如文献Langmuir2011,27,8316–8322中，Lindsey E.Corum等人利用聚乙烯醇和纤维蛋白原，并结合微接触印刷术在材料表面成功实现了血小板图案化调控。虽然这些方法能够成功制备血小板图案化表面，但是需要复杂多步的化学修饰以及蛋白分子的偶联，从而限制了其在临床上的应用和拓展。因此，构建快速、有效、低廉的血小板图案化方法具有十分重要的意义。

多酚类化合物是指植物中一组化学物质统称，因含有多个酚基团而得名，存在于许多普通水果和蔬菜中，来源广泛，成本低廉，而且多酚类化合物最近报道能与多种金属离子通过螯合作用在材料表面快速成膜。如文献Science2013,341,154–157和文献Angew.Chem.Int.Ed.2014,53,5546-5551中，Frank Caruso等人使用多种金属离子做为螯合交联剂，将多酚类化合物单宁酸和表没食子儿茶素没食子酸酯成功修饰在材料表面。

目前尚未见到将多酚类材料转移至目标材料表面而调控血小板粘附行为的类似报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用多酚类化合物在材料表面实现血小板图案化的方法，整个制备过程中无需引入亲水分子和生物活性蛋白，方法简单快速且成本低廉。

本发明实现以上目的采用的技术方案为：

一种利用多酚类化合物在材料表面实现血小板图案化的方法，包含以下步骤：

A)分别配置多酚化合物溶液和金属离子溶液，然后将两种溶液混合，得到多酚-金属离子的混合溶液；

B)将多酚-金属离子溶液滴加到带有微型图案的印章表面，得到多酚材料的图案印章；

C)将含有多酚材料的图案印章与目标材料表面相贴合，使多酚材料转移至目标材料表面，揭掉印章，获得图案化的多酚材料表面；