[发明专利]一株产重楼皂苷Ⅵ的解淀粉芽孢杆菌clx-60菌株及其用途

说明书

本发明提供了一种产重楼皂苷Ⅵ的解淀粉芽孢杆菌CLX‑60菌株，属一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学；邮编430072，保藏日期为2016年9月7日，保藏编号为：CCTCC NO：M2016463；该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。上述解淀粉芽孢杆菌clx‑60菌株能够用于发酵制备重楼皂苷Ⅵ。微生物发酵所采用的培养基配方为：蔗糖12g/L，豆粕15g/L，MgCl₂15g/L，最优培养条件为：pH值6.0，培养温度34℃，摇床转速150r/min。

技术领域

本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌菌株，该菌株可产重楼皂苷Ⅵ，属于微生物技术领域。

背景技术

目前植物内生菌的研究逐渐受到重视，不同植物的各种内生菌相继被发现。内生菌种类的多样性也赋予了其代谢产物的多样性，这也预示着利用微生物代谢发掘生物、化学、医药等新资源具有巨大的潜力。大量的研究表明，植物内生菌可产生与宿主植物相同或相似的活性物质及前体，这一发现直接推动了植物内生菌尤其是药用植物内生菌研究的广泛展开。随着人们对药用植物内生菌的逐步研究，利用能够代谢产生相应活性成分的内生菌来生产新型、高效、低成本的活性药物，解决珍稀中药植物资源紧缺的现状，必将成为将来药用植物内生菌研究的重点。

虽然植物内生菌尤其是药用植物内生菌近些年来越来越受到广大学者的关注，但是目前仍然只开展了几百种植物的内生菌研究，而关于珍稀中药重楼的产药用成分内生菌的研究更是基本上仅现于国内。从重楼植物体中筛选出可代谢产生重楼皂苷、薯蓣皂苷及皂苷元的内生菌的研究为解决重楼药用成分紧缺的现状提供了一条新的途径，目前已有一些学者筛选出了一些产皂苷或其类似物的内生菌，但菌株数量及种类都不多，继续筛选出一些新的产皂苷或皂苷元的菌株，对深入开展微生物发酵产皂苷或皂苷元的途径的研究具有重要意义。

陈小静等从华重楼块茎中分离得到107株内生细菌，其中有6株能够产生薯蓣皂苷或其类似物，分别属于德克斯氏菌属、芽孢杆菌属、动性球菌属、肠杆菌属。张晓洁等从华重楼中分离得到16株内生菌，经筛选发现编号SNUS-1的菌株能代谢产生重楼皂苷或其类似物，并鉴定为托氏假单胞菌。任智等从华重楼中分离得到2株能代谢产生薯蓣皂苷的内生细菌RZ03和RZ07。魏超等从华重楼根茎中筛选出4株能够代谢产生薯蓣皂苷元的内生真菌(WD6H、WD7H、XIAZX和A221H)，分别属于腐皮孢霉菌、木贼镰刀菌、尖抱镰刀菌、大团囊菌科红曲霉。

重楼内生菌近几年来才开始受到人们的关注，总体来说，关于重楼内生菌尤其是能够代谢产生相应甾体皂苷成分的研究依然相对较少，并且大部分集中在华重楼方面，而滇重楼内生菌的研究也只限于内生真菌，鲜有关于产皂苷成分的滇重楼内生细菌的报道。

发明内容

本发明解决了背景技术中的问题，提供了一种产重楼皂苷Ⅵ的解淀粉芽孢杆菌CLX-60菌株，该菌株可产重楼皂苷Ⅵ。

本发明人筛选到一株新型菌株，该菌株被命名为clx-60，属一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学；邮编430072，保藏日期为2016年9月7日，保藏编号为：CCTCC NO：M2016463；该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

上述解淀粉芽孢杆菌clx-60菌株能够用于发酵制备重楼皂苷Ⅵ。微生物发酵所采用的培养基配方为：蔗糖12g/L，豆粕15g/L，MgCl₂ 15g/L，最优培养条件为：pH值6.0，培养温度34℃，摇床转速150r/min。