[发明专利]一种酵母上游激活元件在丝状真菌中的应用有效
申请号: | 201610843380.4 | 申请日: | 2016-09-22 |
公开(公告)号: | CN106636088B | 公开(公告)日: | 2020-06-23 |
发明(设计)人: | 董亢;徐昊珺;李峰;孙艳;姜睿玲;徐红 | 申请(专利权)人: | 南京百斯杰生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/80;C12R1/865 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;夏平 |
地址: | 211100 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酵母 上游 激活 元件 丝状 真菌 中的 应用 | ||
1.来源于酿酒酵母的SEQ ID NO.1所示的上游激活元件UAS在提高丝状真菌中目的蛋白表达量中的应用,其特征在于所述的上游激活元件UAS克隆到终止子的下游位置,丝状真菌目的蛋白编码基因的启动子选自AOX1、gpdA、pki、trpC、NA2、glaA、cbh1、cbhII、Alp、tef或amdS。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述的上游激活元件UAS距离终止子的位置为0bp或50bp。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的上游激活元件UAS为单拷贝、两拷贝、三拷贝、四拷贝、五拷贝、六拷贝、七拷贝、八拷贝、九拷贝、十拷贝或更多拷贝的串联重复。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述的目的蛋白选自糖化酶、葡萄糖氧化酶、酸性蛋白酶、酸性淀粉酶、中性蛋白酶、真菌淀粉酶、植酸酶或脂肪酶。
5.一种提高丝状真菌中目的蛋白表达量的方法,其特征在于构建重组表达载体,将来源于酿酒酵母的SEQ ID NO.1所示的上游激活元件UAS克隆到丝状真菌目的蛋白编码基因的终止子的下游位置;将重组表达载体转化丝状真菌宿主细胞,培养该丝状真菌表达目的蛋白;丝状真菌目的蛋白编码基因的启动子选自AOX1、gpdA、pki、trpC、NA2、glaA、cbh1、cbhII、Alp、tef或amdS。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述的上游激活元件UAS距离终止子的位置为0bp或50bp;所述的上游激活元件UAS为单拷贝、两拷贝、三拷贝、四拷贝、五拷贝、六拷贝、七拷贝、八拷贝、九拷贝、十拷贝或更多拷贝的串联重复。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述的目的蛋白选自糖化酶、葡萄糖氧化酶、酸性蛋白酶、酸性淀粉酶、中性蛋白酶、真菌淀粉酶、植酸酶或脂肪酶。
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