[发明专利]功能化长春花碱脂质体及其应用

权利要求书

1.一种长春花碱脂质体，

所述长春花碱脂质体由脂质体以及包载在所述脂质体内的长春花碱组成；

所述脂质体经转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和硬脂基八聚精氨酸修饰；

所述转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺为由TfR-T₁₂多肽和NHS-PEG₂₀₀₀-DSPE通过酰胺键连接得到的产物。

2.一种制备权利要求1所述长春花碱脂质体的方法，为用转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和硬脂基八聚精氨酸修饰脂质体，并将长春花碱包载在所述脂质体内得到长春花碱脂质体。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

1）制备转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺；

所述制备方法包括如下步骤：将TfR-T₁₂多肽和NHS-PEG₂₀₀₀-DSPE在催化剂的作用下进行酰化反应，得到转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺；

2）用卵磷脂、胆固醇、所述转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和硬脂基八聚精氨酸进行成膜反应，得到修饰后脂质体；

3）将长春花碱包载到所述修饰后脂质体中，得到长春花碱脂质体。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

步骤1）中，所述TfR-T₁₂多肽和NHS-PEG₂₀₀₀-DSPE的投料摩尔比为1:1-3:1；

或，所述催化剂为N-甲基吗啉；

或，所述催化剂与所述TfR-T₁₂多肽的投料配比为200 μL：8 μmol；

或，所述酰化反应的温度为常温，酰化反应的时间为48h；

或，所述酰化反应在溶剂中进行；

或，所述溶剂具体为DMF。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：

步骤2）中，所述卵磷脂、胆固醇、所转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和所述硬脂基八聚精氨酸的投料摩尔比为60:30:3:5。

6.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：

步骤3）中，所述长春花碱和所述修饰后脂质体的投料质量比为1:20。

7.权利要求3或4所述方法中制备得到的所述转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺。

8.权利要求3或4所述方法中制备得到的修饰后脂质体。

9.权利要求7所述的转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺在制备脂质体或制备长春花碱脂质体或修饰脂质体或修饰长春花碱脂质体中的应用。

10.权利要求1所述的长春花碱脂质体或权利要求7所述的转铁蛋白受体结合肽-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺在制备具有如下1)-9）至少一种功能的产品中的应用：

1）杀伤脑胶质瘤细胞或其干细胞；

2）抑制脑胶质瘤细胞或其干细胞增殖；

3）跨越血脑屏障；

4）促进脑胶质瘤细胞或其干细胞凋亡；

5）促进脑胶质瘤细胞或其干细胞的线粒体损伤；

6）提高脑胶质瘤细胞或其干细胞活性氧水平；

7）促进脑胶质瘤细胞或其干细胞的微管损伤；

8）提高脑胶质瘤细胞或其干细胞中促凋亡相关蛋白基因表达；

9）预防和/或治疗脑胶质瘤。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于：所述促凋亡相关蛋白为caspase-3/7、caspase-8、caspase-9、Bax、细胞色素C、Mcl-1、LC3B或FoxO1；

或所述产品为药物或试剂盒。