[发明专利]氯毒素多肽和结合物及其应用

说明书

赖氨酸减少的氯毒素多肽，可以用来产生单一种类的氯毒素结合物。包含这样的氯毒素多肽的结合物及其药物组合物。使用这样的组合物和/或结合物的方法。

本申请是分案申请，其原案申请的申请号为201180012427.8(国际申请号为PCT/US2011/023823)、申请日为2011年2月4日、发明名称为“氯毒素多肽和结合物及其应用”，申请日“2011年2月4日”为国际申请日。

背景技术

氯毒素是来自蝎以色烈金蝎(Leiurius quinquestriatus)的毒液的肽成分，其已表明可以特异性地结合于肿瘤细胞。氯毒素已用作靶向剂来将细胞毒性剂和/或成像剂递送到各种肿瘤，包括转移性瘤和脑瘤如恶性胶质瘤。例如，氯毒素已被结合于放射性同位素碘-131，并且这样的氯毒素结合物已表明是有效的抗肿瘤治疗剂。其它氯毒素结合物，包括融合蛋白，如连接于皂草素的氯毒素-GST融合蛋白也已表明，可以显著和选择性地杀伤肿瘤细胞。

发明内容

氯毒素可以潜在地结合于各种各样的任何制剂，包括细胞毒性剂和/或成像剂。虽然当前可用的氯毒素结合物已经证明具有抗肿瘤特性，但本发明包括确认：更多的氯毒素结合物可以提供许多优点。仅举一个例子，不同的氯毒素结合物可以具有它们自己的若干药物动力学特性，其可以特别适用于给定肿瘤类型和/或患者。另外，本发明确定了某些类型的氯毒素结合物的潜在问题的先前未记载的来源，其源于以下事实：野生型氯毒素多肽(和上述多肽的许多变体)包含超过一个的在此处可以发生结合(或共轭)的位点。因而本发明提供了以下见解：用来产生与氯毒素的结合物的化学反应经常产生结合物物质的混合物。至少在一些实施方式中，上述不同物质可以具有不同的特性。另外，重现用上述氯毒素结合物混合物获得的发现的努力可以受阻于以下挑战：在制备中再现不同物质的分布。质量控制、以及甚至分析可以是困难或不可能的。

本发明提供了新类型的氯毒素结合物，并确定了对于其它氯毒素结合物可能遇到的问题的来源。即，本发明认识到，许多先前的氯毒素结合物是通过将感兴趣的部分或实体化学结合于氯毒素多肽来制备。根据本发明，认识到，至少在一些情况下，上述方式产生结合物的混合群体，其中多个感兴趣的部分或实体在不同的点或位置结合于氯毒素。

本发明包括以下确认：上述混合物可能难以表征和/或重现，并且可以显示不同的特性(例如，药物动力学特性)，这些差异可以是不可预测的。本发明包括以下确认：例如，在治疗和/或诊断应用中，可以更期望仅包含单一氯毒素结合物的制剂而不是包含结合物的混合物的制剂。

本发明还提供了对于已确定的问题来源的解决方案。例如，本发明提供了赖氨酸减少的氯毒素多肽，其可以产生单一种类的结合物。在某些实施方式中，提供了赖氨酸减少的氯毒素多肽。在多个方面，提供了氯毒素结合物，其包含具有不超过一个可用作结合位点的赖氨酸的氯毒素多肽(“单一赖氨酸氯毒素结合物”)，包含上述结合物的药物组合物，以及应用上述结合物的方法。在一些实施方式中，提供了没有赖氨酸残基的赖氨酸减少的氯毒素多肽。

在某些实施方式中，本发明提供了制备和应用赖氨酸减少的氯毒素多肽和其结合物的方法。在一些实施方式中，提供的赖氨酸减少的氯毒素多肽和/或其结合物可以用于医药(例如，在各种治疗和/或诊断背景中)。

定义

如在本文中所使用的，在提及数目时，术语“约”和“大约”，在本文中用来包括这样的数目，其是在任一方向(大于或小于)20％、10％、5％、或1％的范围内，除非另有说明或根据上下文明显的(除非这样数目将超过可能值的100％)。