[发明专利]一种孔雀草总黄酮提取物在制备免疫增强药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物药提取方法及其应用，具体是以孔雀草总黄酮为活性成分的药物提取物及其在治疗免疫低下疾病中的用途。

背景技术

孔雀草(Tagetes patula L.)又名小万寿菊，红黄草，西番菊，臭菊花，缎子花(云南)，为菊科万寿菊属植物，为一年生草本，花期为7月～9月。原产墨西哥，在我国云南中部及西北部、四川中部和西南部及贵州西部均已归化，现我国各地均有栽培，是一种常见的观赏花卉。孔雀草有药用和保健作用，在傈僳族、彝族中均作为药物加以应用。其味苦性平，清热利湿，止咳。用于咳嗽，痢疾，顿咳，牙痛，风火眼痛；外用于痄腮，乳痛(贾敏如.中国民族药志要[M].中国医药科技出版社，2005.；张惠源.中国中药资源志要[M].科学出版社，1994.)。

从20世纪80年代开始，人们即开始对孔雀草的化学成分进行研究，分离得到万寿菊素(patuletin)，槲皮万寿菊素(quercetagetin)，槲皮万寿菊甙(quercetagitrin)等黄酮类化合物(国家中医药管理局《中华本草》编委会，中华本草[M]，上海科学技术出版社，1999年版)。孔雀草挥发油中主要成份为2-蒈烯、β-水芹烯、胡椒酮、胡椒烯酮、异松油烯、柠檬烯等(胡建安，孔雀草精油化学成分初探[J].香料香精化妆品，1992(01)：24-26.；Romagnoli C，Bruni R，Andreotti E，et al.Chemical characterization and antifungal activity of essential oil of capitula from wild Indian Tagetespatula L[J].Protoplasma，2005，225(1-2)：57-65)，目前人们多对孔雀草花卉进行研究，药用价值研究较少。

多种疾病与免疫功能低下有关，如肿瘤、AIDS和老年性疾病。免疫力低下的机体易罹患癌症、肿瘤或者容易被细菌、病毒、真菌等感染，导致生病，从而使机体的消耗量更加严重，那些免疫力低下者便通常有下述表现：体质虚弱、营养不良、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍、精神衰弱等。随着时间推移，会导致于青少年身体和智力发育不良，使中老年人则易诱发重大疾病。

中药对免疫低下疾病的治疗具有其独特的优势，其副作用较化学药低，而疗效往往比化学药好，被广泛应用在临床上，因此寻找疗效确切、安全可靠的免疫增强药物，可以很大程度上改善人们的生活质量，减轻人民的生活负担，具有良好的应用前景。

前期我们发现孔雀草总黄酮提取物具有抗帕金森作用(蔡德成，窦德强：孔雀草总黄酮提取物、制备方法及应用，申请号：201511022920.4，申请日：2015.12.26)。近期在治疗免疫 低下小鼠药效学试验中，我们惊喜地发现孔雀草总黄酮具有较好的免疫增强药理作用。经文献检索，未有孔雀草治疗免疫低下疾病药理作用报道，于是形成本专利。所制备的孔雀草中总黄酮提取物中总黄酮的含量约30％以上，测定方法参见文献(迟玉新，窦德强.楮实子与构树叶中总黄酮含量测定[J].中国现代中药，2008，11：16-17.)。本专利孔雀草经醇提取，大孔吸附树脂纯化制备孔雀草总黄酮，使其适合开发成为治疗免疫低下疾病的药物。

发明内容

为实现上述目的而采用的技术方案如下：

1.建立制备孔雀草总黄酮提取物的方法

(1)用80％乙醇水(体积比)溶液对孔雀草全草(包括根及地上部分，粉碎成10目粉末)进行浸渍提取，每次溶剂用量为药材质量的10倍量，40℃温浸12小时，浸提2次。合并提取液后经浓缩得到浓缩液(约为药材质量的1倍量)；

(2)上述浓缩液用1/2浓缩液体积的石油醚萃取三次脱脂，得到脱脂浓缩液；

(3)上述脱脂浓缩液进一步经大孔吸附树脂HPD100分离(树脂用量为孔雀草用量的1/2倍)，先用水洗(5倍树脂体积)，再用60％乙醇水溶液洗脱，得到60％乙醇水洗脱液，经减压回收乙醇，干燥得孔雀草总黄酮提取物。

2.孔雀草总黄酮用于免疫增强作用的药理学研究

上述孔雀草总黄酮提取物用于治疗免疫低下模型小鼠的药理试验研究。

3.所得孔雀草总黄酮可单独或与其它药物组合，制成免疫增强作用的药物。

具体实施方式