[发明专利]一种硫酸鱼精蛋白副凝固实验检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种硫酸鱼精蛋白副凝固实验检测方法。

背景技术

弥散性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation；DIC)不是一种独立的疾病，而是许多疾病在进展过程中产生凝血功能障碍的最终共同途径，是一种临床病理综合征。由于血液内凝血机制被弥散性激活，促发小血管内广泛纤维蛋白沉着，导致组织和器官损伤；另一方面，由于凝血因子的消耗引起全身性出血倾向。两种矛盾的表现在DIC疾病发展过程中同时存在，并构成特有临床表现。在DIC已被启动的患者中引起多器官功能障碍综合征将是死亡的主要原因。国内尚无发病率的报道。DIC病死率高达31％～80％。因此，准确检测弥散性血管内凝血显得尤为重要。

1999年10第七届全国血栓与止血学术会上提出的1999年10第七届全国血栓与止血学术会上，提出了经典的血浆蛋白副凝固实验用于诊断弥散性血管内凝血(DIC)，但是由于其纯手工操作，肉眼判断结果，导致准确度不高，临床的认可度不是太高，目前有被更为灵敏和特异的D-二聚体和纤维蛋白降解产物(FDP)取代的趋势。而D-二聚体和纤维蛋白降解产物检测的成本太高。DIC的发生首先是纤维蛋白单体(FM)的出现，而目前测定纤维蛋白单体(FM)的试剂相当昂贵，而且需要特殊仪器。

急需提供一种成本低廉、检测结果准确的检测方法能测定或反应FM的存在。或者能找到D-D、FDP的替代方法。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种成本低廉、灵敏度和特异性高的检测方法，具体是血浆蛋白副凝固实验的改良方法。

本发明一种硫酸鱼精蛋白副凝固实验检测方法，步骤如下：取待检血浆，加入浓度为0.005g/ml的硫酸鱼精蛋白溶液，测定反应体系的散射光强度变化。

反应体系中，若有纤维蛋白凝块的形成，样品的散射光强度逐渐增强，仪器把这种光学变化描绘成凝固曲线，当样品完全凝固以后，散射光的强度得以稳定，同时记录凝固时间(T)和曲线上升高度(dH)。

优选地，仪器自动加样，和/或先将待检血浆预热到37℃。

优选地，所述硫酸鱼精蛋白溶液的加入量为血浆的1/4。

其中，测定反应体系的散射光强度变化采用全自动凝血分析仪如，型号为SYSMEX CA7000的全自动凝血分析仪检测。

本发明方法可以准确、有效地检测弥散性血管内凝血，而且成本非常低廉，适用于临床使用，应用前景非常良好。

下面通过具体实施方式对本发明做进一步详细说明，但是并不是对本发明的限制，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

附图说明

图1阴性实验结果图；

图2阳性实验结果图；

图3试剂名称及位置设置图；

图4本发明方法的ROC曲线图；

图5现有方法的ROC曲线图；

图6本发明方法与FM检测的ROC曲线图；

图7重复性实验结果(阴性样本)；

图8重复性实验结果(阳性样本)。

具体实施方式

实施例1 本发明硫酸鱼精蛋白副凝固实验检测方法

1、检测仪器和试剂

光学法凝血测定仪，SYSMEX公司CA7000。

硫酸鱼精蛋白试剂，北京悦康凯悦制药有限公司生产的硫酸鱼精蛋白注射液(5ml：50mg)，其中硫酸鱼精蛋白的浓度为0.01g/ml。

2、检测方法

反应管中加入血浆120uL，37℃预温3分钟，加入硫酸鱼精蛋白溶液与生理盐水的混合溶液30uL(硫酸鱼精蛋白注射液：生理盐水的体积比1：1)，加入试剂后检测反应体系的散射光强度变化。

判定标准：在600s内，散射光强度的反应曲线没有变化，判定为阴性(如图1所示)；反之，600s内散射光强度的反应曲线升高则判定为阳性(如图2所示)。

以下用是实验例的方式来说明本发明的有益效果：

实验例1 本发明方法的灵敏度和特异性

1、实验方法

采用光学法凝血测定仪，SYSMEX公司CA7000，根据图3设置检测方案(试剂量，样本量，加样时间，反应检测时间等)，试剂名称及位置后，采用实施例1的方法，进行灵敏度和特异性的检测。

2、实验结果