[发明专利]用于测定甘油三酯的试剂盒和方法

说明书

本发明涉及用于测定甘油三酯的试剂盒和方法。所述试剂盒包含试剂组1和试剂组2，所述试剂组1包含镁盐、三磷酸腺苷、甘油激酶、甘油磷酸氧化酶、过氧化物酶和色原，所述试剂组2包含脂蛋白脂肪酶和4‑氨基安替比林，其中，所述色原是或者包含N‑乙基‑N‑(2‑羟基‑3‑磺丙基)‑3,5‑二甲氧基苯胺(DAOS)。本发明的试剂盒和方法可以降低甘油三酯检测中由样品中存在的羟苯磺酸钙和/或酚磺乙胺所造成的干扰。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域。特别地，本发明涉及一种用于检测甘油三酯的试剂盒和方法。

背景技术

甘油三酯(Triglyceride，TG)是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用TG分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行TG的合成，在脂肪组织中贮存。

甘油三酯也是血脂的主要组成部分，是机体重要的供能物质。食物中的甘油三酯在肠道经胰脂酶消化分解，吸收后重新酯化为甘油三酯，经淋巴系统进入血液。在病理条件下，各种组织细胞合成和贮存的甘油三酯显著增加。定量检测血液和组织细胞中甘油三酯含量，是临床、临床基础、基础医学生物学研究常用的生化指标。

甘油三酯的升高可见于家族性高甘油三酯血病、糖尿病、糖原累积症、甲状腺功能不足、肾病综合征、高血压、脑血管病、冠心病、肥胖等。甘油三酯减低可见于甲状腺功能亢进，肾上腺皮质机能减退，肝功能严重低下，癌症晚期等。

甘油三酯的升高可见于家族性高甘油三酯血病、糖尿病、糖原累积症、甲状腺功能不足、肾病综合征、高血压、脑血管病、冠心病、肥胖等。甘油三酯减低可见于甲状腺功能亢进，肾上腺皮质机能减退，肝功能严重低下，癌症晚期等。

甘油三酯测定的决定性方法为放射性核素稀释-质谱法；参考方法为二氯甲烷抽提，变色酸显色法；常规方法为酶法(GPO-PAP法)。酶法测定特异性强，测定准确度及灵敏度较高，操作简便，试剂无腐蚀性，可全自动操作，性价比高，是目前国内外推荐使用的临床常规的测定方法。目前市售的试剂盒绝大多数采用此法。

该法主要原理：脂蛋白脂肪酶(LPL)水解TG生成甘油和脂肪酸；水解后的甘油与三磷酸腺苷(ATP)在甘油激酶(GK)和磷酸甘油氧化酶(GPO)的催化下生成H₂O₂，H₂O₂偶联Trinder反应呈色，即H₂O₂与4-氨基安替比林(4-AAP)和色原在过氧化物酶(POD)的作用下生成醌亚胺，其生成量与样本中的TG含量成正比。

已有文献报道某些药物(例如羟苯磺酸钙和酚磺乙胺)会对基于Trinder反应的试剂产生负干扰，从而得到不正确的结果，影响临床医生做出判断，最终延误患者治疗，或采用不合理治疗措施导致患者伤亡。例如，参见程涌江等，“酚磺乙胺对部分生化检验项目干扰的相关研究，《国际检验医学杂志》，2011年第11期。

羟苯磺酸钙(calcium dobesilate)(又称多贝斯(doxium))是毛细血管保护剂，主要用于治疗微血管病、静脉曲张综合症以及与微循环障碍伴发额静脉功能不全，还用于静脉剥离和静脉硬化法的辅助治疗，用于预防术后综合症，水肿及组织浸润。

酚磺乙胺(又名止血敏)的化学名称为2,5-二羟基苯磺酸二乙胺盐。其能使血小板数量增加，并增强血小板的凝集和黏附力，促进凝血活性物质的释放，从而产生止血作用。酚磺乙胺在临床上主要用于预防和治疗外科手术出血过多，血小板减少性紫癜或过敏性紫癜以及其他原因引起的出血。

羟苯磺酸钙和酚磺乙胺对酶法检测甘油三酯的干扰对被施用这两种药物的患者造成很大的不便。例如，对于糖尿病患者而言，常伴冠心病、血管动脉硬化等，而所施用的羟苯磺酸钙对酶法检测甘油三酯的干扰可能造成糖尿病患者的甘油三酯水平无法得到正确评估，掩盖并延误病情。而对于手术患者，所施用的酚磺乙胺对酶法检测甘油三酯的干扰可能使得不能正确评估其甘油三酯水平，造成术后并发症，影响患者的预后。