[发明专利]谷胱甘肽模板金纳米簇在检测半胱氨酸和赖氨酸中的应用

说明书

本发明公开了一种谷胱甘肽稳定的金纳米簇在检测半胱氨酸和赖氨酸含量中的应用。将新制备的谷胱甘肽水溶液和四氯金酸水溶液等浓度、等体积在剧烈搅拌下混合，然后将混合物在光照条件下反应2‑5天，得到浅黄色溶液，离心，上清液通过渗析膜纯化，制备得到的谷胱甘肽稳定的金纳米簇，其可作为荧光探针和比率荧光探针分别或同时检测半胱氨酸和赖氨酸中的应用，具有高选择性、高灵敏度、简便、易行等特性，本发明制备方法简便、绿色、温和。

技术领域

本发明属于氨基酸检测领域，具体涉及一种谷胱甘肽稳定的金纳米簇检测半胱氨酸和赖氨酸含量中的应用。

背景技术

氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，人体内20种氨基酸具有各自不同的功能，相互促进并相互影响。如果人体缺乏任何一种必需氨基酸，就可导致生理功能异常，影响抗体代谢的正常进行，最后导致疾病。由于氨基酸缺乏和代谢障碍所引起的疾病涉及免疫、神经系统、心脑血管、肾脏、代谢、糖尿病等各类疾病，影响人体生长发育、营养健康、肌肉骨骼生长、激素分泌、解毒功能等各个健康环节。半胱氨酸是一种具有生理功能的氨基酸，是组成蛋白质的20多种氨基酸中惟一具有还原性基团巯基(-SH)的氨基酸，巯基能与与Ag⁺、Hg²⁺、Cu²⁺、Pb²⁺等重金属离子结合，与有毒的芳香族化合物缩合而发挥解毒作用，还具有抗氧化功能同时清除体内自由基。赖氨酸是人体必需氨基酸之一，一种不可缺少的营养物质。能促进机体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用。目前被广泛应用于医药、食品和饲料工业等。因此，检测半胱氨酸和赖氨酸含量对临床医学诊断、食品检验和工业生产等都具有重要意义。

目前测量半胱氨酸、赖氨酸含量的方法主要有光度分析法、高效液相色谱-质谱法、毛细管电泳法、流动注射法等。半胱氨酸、赖氨酸的检测通常受到反应时间长、反应条件如pH值酸碱性、操作复杂、灵敏度和选择性低的影响。寻找新的高灵敏、高选择性、简便、快速并且能够同时检测检测半胱氨酸和赖氨酸含量的新方法具有重要的研究意义。

发明内容

发明目的：鉴于以上半胱氨酸、赖氨酸含量的检测方法目前存在的问题，本发明提供一种谷胱甘肽稳定的金纳米簇检测半胱氨酸和赖氨酸含量中的应用，制备该谷胱甘肽稳定的金纳米簇的方法简便、绿色、温和，检测方法具有高选择性、高灵敏度、简便、易行等特性。

本发明的技术方案：

谷胱甘肽稳定的金纳米簇作为荧光探针和比率荧光探针在检测半胱氨酸含量中的应用。

谷胱甘肽稳定的金纳米簇作为荧光探针和比率荧光探针在检测赖氨酸含量中的应用。

谷胱甘肽稳定的金纳米簇作为荧光探针和比率荧光探针在同时检测半胱氨酸和赖氨酸含量中的应用。

谷胱甘肽稳定的金纳米簇检测半胱氨酸含量的方法，包括以下步骤：

步骤(a1)：在402 nm波长光的激发下，测定谷胱甘肽稳定的金纳米簇在570 nm波长处的荧光强度，记为I₀；

步骤(a2)：向步骤(a1)所述谷胱甘肽稳定的金纳米簇中加入不同浓度待测样品半胱氨酸后，测定含有不同浓度半胱氨酸的谷胱甘肽稳定的金纳米簇在402 nm波长光激发下，在570 nm波长处的荧光强度，记为I₅₇₀，根据加入不同浓度半胱氨酸后，荧光强度的变化值，计算出加入半胱氨酸前后谷胱甘肽稳定的金纳米簇荧光强度的变化值与半胱氨酸浓度的线性关系；

步骤(a3)：将待测样品加入谷胱甘肽稳定的金纳米簇中，测试其加入前后在402nm波长光的激发下，在570 nm波长处的荧光强度的变化值，根据步骤(a2)得到的线性关系，计算出加入半胱氨酸的质量或浓度。