[发明专利]一种肋脉野豌豆的扩繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物扩繁技术领域，尤其涉及一种肋脉野豌豆的扩繁方法。

背景技术

优良的牧草品种是畜牧业重要的生产资料，具有栽培和育种价值，但有些具有突出的野生种性，不利于栽培利用。

肋脉野豌豆是一种比较典型且珍贵的旱生豆科牧草种质资源，极其耐旱，在我国干旱地区能发挥重要的生态、经济价值。肋脉野豌豆是野生种，虽保留了珍贵的抗逆特性，但自身也有一些缺点，如：花期长且不一致，硬实，落粒性强导致种子收获产量低，种源缺乏，限制了肋脉野豌豆的推广应用。因此，提高肋脉野豌豆种子产量及繁殖系数有着重要的理论价值及现实意义。

目前，国内外对肋脉野豌豆的研究主要集中在栽培引种驯化、遗传多样性及抗性基因等方面，其中涉及种子发芽及繁殖体系的相关研究报导较少，肋脉野豌豆种植材料十分缺乏。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肋脉野豌豆的扩繁方法。本发明提供的扩繁方法繁殖速度快、成本低、培育周期短。

本发明提供了一种肋脉野豌豆的扩繁方法，包括以下步骤：

1)将前处理后的种子置于培养基中进行培养，获得无菌苗；

2)将所述无菌苗切割得到的茎段置于第一再分化培养基中进行培养，获得再生植株；

所述第一再分化培养基为包括0～1mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0～1.5mg/L吲哚丁酸、质量分数0.6～0.8％琼脂和质量分数2～4％蔗糖的MS培养基；

3)将所述再生植株切割得到的茎段置于第二再分化培养基中进行完整植株的培养；

所述第二再分化培养基为包括0～1.4mg/L 1-萘乙酸、质量分数0.6～0.8％琼脂和质量分数2～4％蔗糖的1/2MS培养基。

优选的是，所述步骤1)的前处理包括：破除种子硬实后冲洗；

将所述冲洗后的种子在乙醇水溶液中浸泡；

将所述浸泡后的种子消毒；

将所述消毒后的种子采用无菌水冲洗。

优选的是，所述步骤1)中的培养基为MS固体培养基或1/2MS固体培养基。

优选的是，所述步骤2)和步骤3)中的茎段含有叶芽，所述茎段的长度独立地选为1～2cm。

优选的是，所述步骤2)中培养的条件为：温度为22～28℃，光照条件为白/昼＝12h/12h，培养的时间为30～45d。

优选的是，所述步骤3)中完整植株培养的温度为22～28℃，培养的时间为40～90d。

优选的是，所述步骤3)得到完整植株后还包括：将所述完整植株进行炼苗和移栽，所述炼苗的时间为2～4d。

优选的是，所述移栽具体为：将炼苗后的植株放入沙土与营养土质量比为(2～4)：1的基质中，保湿保温培养9～12d。

本发明提供的肋脉野豌豆的扩繁方法通过前处理、第一再分化和第二再分化得到了扩繁后的肋脉野豌豆，肋脉野豌豆是野生种，其落粒性强导致种子收获产量低，种源缺乏，并且硬实性较强，本发明所述扩繁方法保证了较高的种子发芽率，且扩繁系数高。试验效果表明，本申请的扩繁方法对肋脉野豌豆种子的利用效率高，成活率高。

附图说明

图1是本发明实施例1得到的无菌苗示意图；

图2是本发明实施例1得到的再生植株示意图；

图3是本发明实施例1得到的完整植株示意图；

图4是本发明实施例4得到的完整植株移栽效果图；

图5是本发明实施例4得到的完整植株移栽效果图。

具体实施方式

本发明提供了一种肋脉野豌豆的扩繁方法，包括以下步骤：

1)将前处理后的种子置于培养基中进行培养，获得无菌苗；

2)将所述无菌苗切割得到的茎段置于第一再分化培养基中进行培养，获得再生植株；

所述第一再分化培养基为包括0～1mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、0～1.5mg/L吲哚丁酸、质量分数0.6～0.8％琼脂和质量分数2～4％蔗糖的MS培养基；

3)将所述再生植株切割得到的茎段置于第二再分化培养基中进行完整植株的培养；

所述第二再分化培养基为包括0～1.4mg/L 1-萘乙酸、质量分数0.6～0.8％琼脂和质量分数2～4％蔗糖的1/2MS培养基。

本发明优选将肋脉野豌豆种子进行前处理。在本发明中，所述前处理优选包括：破除种子硬实后冲洗；

将所述冲洗后的种子在乙醇溶液中浸泡；

将所述浸泡后的种子消毒；

将所述消毒后的种子采用无菌水冲洗。