[发明专利]一种木耳液体冻干菌种的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌菌种培养领域，具体地说是一种木耳液体冻干菌种的生产方法。

背景技术

木耳人工栽培所使用的菌种多采用固体发酵法制备，但该法生产周期长、劳动强度大、劳动效率低、易受杂菌污染，同固体菌种相比，液体菌种具有周期短、菌龄整齐发菌快、接种方便、不易污染等优点，是未来食用菌制种的发展方向。但液体菌种也有不易储藏和运输的缺点，限制了液体制种技术在食用菌栽培领域的应用。

发明内容

本发明的技术任务是提供一种木耳液体冻干菌种的生产方法。

本发明的技术任务是按以下方式实现的，该生产方法步骤如下：

1)在无菌条件下，将木耳母种在斜面培养基中培养，培养条件为：温度24～32℃，时间5～8天，待菌丝布满斜面为止；

2)将斜面菌丝移种到摇瓶液体培养基静置培养1～2天后再进行振荡培养扩增；

3)将培养成熟的摇瓶菌种按5～10％的接种量接种到发酵罐进行培养扩增；

4)将发酵罐培养成熟的菌液进行离心或过滤处理收集菌丝球，并对菌丝球进行破碎处理；

5)向破碎好的菌丝体添加冻干保护剂，并在冰箱内预冻0.5～2小时；

6)将预冻好的菌丝体在冷冻干燥机内干燥18～30小时后分割成块即为冻干菌种。

所述的斜面培养基由以下重量份配比的原料制成：

马铃薯10～25份，蔗糖1～5份，琼脂1～2.5份。

所述的液体培养基制备方法如下：

将适量马铃薯、麸皮放入水中熬汁，然后在上述液体中加入适量葡萄糖、硫酸镁、硫酸二氢钾和维生素B₁，混合均匀后获得液体培养基；

所述的各原料的重量份配比如下：

马铃薯10～20份，葡萄糖1～5份，硫酸镁0.01～0.08份，硫酸二氢钾0.05～0.2份，维生素B₁0.01～0.1份，麸皮1～10份。

所述的摇瓶液体种子培养条件为：温度25～32℃、摇床转速100～200r/min，装液量为100～180ml/500ml三角瓶，培养周期为4～7天。

所述的发酵罐液体种子培养条件为：温度25～32℃、转速100～180r/min，通气量0.02～0.1Mpa，培养周期为4～7天。

所述的冻干保护剂为脱脂乳、谷氨酸钠、D-山梨醇、维生素C、蔗糖、葡萄糖及海藻糖中的一种或两种以上的混合物。

本发明的木耳液体冻干菌种的生产方法和现有技术相比，本发明液体培养部分形成的菌丝球大小均一、菌体量大且菌丝球个数多，冻干后的菌粉接种固体培养基后能够正常萌发，且萌发点多、发菌快、出菇周期短，接种24h菌丝布满料面，3-15天长满菌袋；另外，本发明生产的液体冻干菌室温下可以保存半年活力不衰退，接种方便，将冻干菌粉溶于适量无菌水中即可喷晒接种，长期保持菌种性能稳定，便于工业化生产，具有较高的推广应用价值。

具体实施方式

实施例1：

在无菌条件下，将木耳母种在斜面培养基中培养，培养条件为：温度24℃，时间5天，待菌丝布满斜面为止；将斜面菌丝移种到摇瓶液体培养基静置培养1天后再进行振荡培养扩增，培养条件为：温度25℃、摇床转速100r/min，装液量为100ml/500ml三角瓶，培养周期为4天；将培养成熟的摇瓶菌种按5％的接种量接种到发酵罐进行培养扩增，培养条件为：温度25℃、转速100r/min，通气量0.02Mpa，培养周期为4天；将发酵罐培养成熟的菌液进行离心或过滤处理收集菌丝球，并对菌丝球进行破碎处理；向破碎好的菌丝体添加冻干保护剂，并在冰箱内预冻0.5小时；将预冻好的菌丝体在冷冻干燥机内干燥18小时后分割成块即为冻干菌种。

上述斜面培养基的原料重量配比如下：

马铃薯10kg，蔗糖1kg，琼脂1kg。

上述液体培养基制备方法如下：

将10kg马铃薯、1kg麸皮放入沸水中熬汁，然后在上述熬好的汁液中加入1kg葡萄糖、0.01kg硫酸镁、0.05kg硫酸二氢钾和0.01kg维生素B₁，混合均匀后获得液体培养基。

实施例2：