[发明专利]一种水稻OsFLRs基因及其应用有效

专利信息
申请号: 201610914213.4 申请日: 2016-10-20
公开(公告)号: CN107964548B 公开(公告)日: 2021-03-23
发明(设计)人: 汪龙;林亲录;于峰;杨涛;李驰宇;刘选明 申请(专利权)人: 中南林业科技大学;湖南大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N9/12;C12N15/82;A01H5/10;A01H6/46;C12Q1/6895
代理公司: 长沙市标致专利代理事务所(普通合伙) 43218 代理人: 曹花
地址: 410000 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 一种 水稻 osflrs 基因 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种水稻OsFLRs基因在水稻中的应用,包括水稻OsFLRs基因在调控稻米粒型和稻米营养品质上的应用,所述OsFLRs基因分别为如SEQ ID NO.1所示的OsFLR1基因和如SEQ IDNO.2所示的OsFLR2基因,其编码的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求1所述一种水稻OsFLRs基因在水稻中的应用,其特征在于,其具体操作包括:OsFLR1和OsFLR2基因的克隆;构建水稻OsFLRs基因的过表达载体并转化入农杆菌菌株;再将农杆菌侵染水稻愈伤组织后筛选获得35S::FLR135S::FLR2过表达株系。

3.如权利要求2所述一种水稻OsFLRs基因在水稻中的应用,其特征在于,构建水稻OsFLRs基因的过表达载体并转化入农杆菌菌株的具体操作为:将阳性质粒pMD18-T-FLR1和pMD18-T-FLR2经XbalIKpnI双酶切后回收,与同样经XbalIKpnI双酶切回收后的pCAMBIA1300混合,加入T4连接酶及连接buffer,连接过夜后,转化感受态Top10,涂LB平板,37℃过夜培养后,即可以进行获得单菌落,进行菌落PCR鉴定可以获得35S::FLR1-pCAMBIA130035S::FLR2-pCAMBIA1300;35S::FLR1-pCAMBIA130035S::FLR2-pCAMBIA1300的阳性克隆质粒转化入Ag10感受态细胞,涂布LB平板培养,28℃倒置培养2d,形成单菌落,并利用菌落PCR筛选出携带目的基因的农杆菌。

4.如权利要求3所述一种水稻OsFLRs基因在水稻中的应用,其特征在于,将农杆菌侵染水稻愈伤组织后筛选获得35S::FLR135S::FLR2过表达株系的具体操作为:将含有35S::FLR1-pCAMBIA130035S::FLR2-pCAMBIA1300重组载体的农杆菌转入水稻愈伤组织,通过筛选、分化、生根后得到阳性的过表达植株,并通过PCR鉴定植株的真实性。

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