[发明专利]Slc6a11基因及其蛋白的用途

说明书

本发明提供了Slc6a11基因及其蛋白的用途，具体地，本发明提供了一种非人哺乳动物的痛觉耐受动物模型的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)提供一非人哺乳动物胚胎干细胞，将所述细胞中的Slc6a11基因失活，得到Slc6a11基因失活的胚胎干细胞；(2)利用所述的Slc6a11基因失活的胚胎干细胞和一野生型囊胚，制备一嵌合囊胚；(3)利用所述的嵌合囊胚，制备痛觉耐受动物模型。本发明提供的痛觉耐受动物模型对痛觉刺激不敏感，可以被用于痛觉的相关研究，并可以用于特定药物的筛选和测试试验。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地涉及Slc6a11基因及其蛋白的用途。

背景技术

γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)是哺乳动物中枢神经系统最重要的抑制性氨基酸类神经递质，能介导抑制性突触传递作用，从而防止脑内神经元过度兴奋，参与控制神经兴奋、信息处理、认知、记忆和学习等重要过程。

能够释放GABA的神经元称为GABA能神经元。GABA能神经元存在于所有的皮质层，在第IV层和II至III间比例较高，大约占所有皮层神经元的20-30％。储存于GABA能神经元轴突末端囊泡中的GABA通过胞吐作用释放，与位于突触后膜的GABA受体结合。在成熟脑组织中，GABA受体(GABA_A受体和GABA_B受体)被GABA激活后打开氯离子通道，使氯离子流入神经细胞内，导致膜电位超极化，发挥神经细胞的抑制性效应。细胞外GABA的浓度决定了GABA受体被激活程度，因此维持细胞外GABA的低浓度水平对于减少或终止GABA能的抑制性突触传递、维持正常的神经信号传递具有至关重要的作用。在哺乳动物神经系统中，这种对细胞外GABA低浓度的维持是通过细胞对GABA的重摄取来完成。GABA的重摄取是由具有高亲和力的特异性Na⁺/Cl^-离子依赖的GABA转运蛋白(GABA Transporters，GATs)来执行。GABA转运蛋白能有效控制GABA在突触间隙的停留时间以及浓度，从而精确调节GABA能的信号传导，维持中枢神经系统正常递质水平，保证GABA信号传递的正确性。

目前，本领域关于GABA的研究还不充分，迫切需要对其机理和功能进行进一步的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种非人哺乳动物痛觉耐受的动物模型。

在本发明的第一方面，提供了一种非人哺乳动物的痛觉耐受动物模型的制备方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供非人哺乳动物的细胞，将所述细胞中的Slc6a11基因失活，得到Slc6a11基因失活的细胞；

(b)利用步骤(a)中得到的Slc6a11基因失活的细胞，制备得到Slc6a11基因失活的痛觉耐受动物模型。

在另一优选例中，所述的细胞为胚胎干细胞。

在另一优选例中，所述的步骤(b)还包括步骤：

(b1)利用所述的Slc6a11基因失活的细胞和一野生型囊胚，制备一嵌合囊胚；

(b2)利用所述的嵌合囊胚，制备痛觉耐受动物模型。

在另一优选例中，所述的步骤(b2)还包括步骤：

(i)培养所述的嵌合囊胚，使其发育为嵌合体非人哺乳动物；

(ii)将所述的嵌合体非人哺乳动物与野生型非人哺乳动物交配繁育，在后代中筛选获得Slc6a11基因失活的杂合子非人哺乳动物；

(iii)将所述的杂合子非人哺乳动物相互交配繁育，在后代中筛选获得Slc6a11基因失活的纯合子非人哺乳动物，即为所述的痛觉耐受动物模型。

在另一优选例中，所述的嵌合囊胚中有部分细胞的Slc6a11基因失活。