[发明专利]一种组织培养中外植体消毒的方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，更具体地说，涉及一种组织培养中外植体消毒的方法。

背景技术

植物组织培养用的外植体材料大部分取自田间，但因为在植物表面上附着大量的微生物。因此在植物材料接种前必须要进行消毒处理，目的是既要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤植物材料而不至于影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要的一环。

目前在组织培养中常用的外植体消毒过程中主要存在以下突出问题：外植体处理不当，导致外植体成活率低或外植体消毒不彻底，导致污染率高，影响了组培繁殖的效率和产量。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种组织培养中外植体消毒方法，该消毒方法对外植体消毒彻底，且损伤率降低。

一种组织培养中外植体消毒的方法，包括：

清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；

将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；

将所述第一预处理外植体浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；

将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；

冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。

优选地，清洗干净外植体表面实现为：将外植体用自来水冲洗5-7次，再将所述外植体材料切成段或块或片状，自来水清洗外植体表面达到10-15min。

优选地，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：

升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。

优选地，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间实现为：

升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡5-10min。

优选地，冲洗所述第三预处理外植体包括：利用无菌水冲洗所述第三预处理外植体材料10-15min。

从上述的技术方案可以看出，本发明实施例的组织培养中外植体消毒方法合理使用洗剂，并配合清洁/振动的技术，对外植体进行一系列消毒操作，由于时间、步骤及清洗剂配比的正确选择，外植体清洁效果显著且外植体存活率高，达到了提高清洁效果及降低损伤率的技术目的。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种组织培养中外植体消毒方法，以实现对外植体消毒彻底，且损伤率降低的技术目的。

该组织培养中外植体消毒的方法，包括：

S11:清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；

S12:将所述清洗后外植体浸泡在70％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；

S13:将所述第一预处理外植体浸泡在5％-10％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；

S14:将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；

S15:冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体。

上述消毒方案，为了能够消毒达到良好效果，包含多个消毒步骤，并采用不同清洗剂，以保证消除不同微生物的目的。同时，为了不影响外植体成活率不同清洗剂采用合适的配比以保证外植体植株安全。

如下：是针对以上步骤的优选方案，需要说明的是：如下方案作为优选，实验人员可根据实际情况在合理范围内选用，并不仅仅局限于此：

S11中：清洗干净外植体表面实现为：

将外植体用自来水冲洗5-7次，再将所述外植体材料切成段或块或片状，自来水清洗外植体表面达到10-15min。

将外植体用自来水冲洗5-7次，以洗净表面的灰尘等杂质。

S12中：在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：

升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。

S13-14中：在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间实现为：