[发明专利]重组制备的因子VIII的新型保护组合物

说明书

本发明提供一种无组氨酸的组合物，所述组合物包括：高纯度因子VIII(r‑因子VIII)；精氨酸和/或蔗糖；防止或至少抑制因子VIII的表面吸附的表面活性剂；用于因子VIII的特定稳定化的一定量的氯化钙。

(本申请是申请日为2009年9月3日、申请号为200980134370.1(国际申请号为PCT/EP2009/061402)的发明申请的分案申请。)

技术领域

本发明涉及具有保护高纯度重组制备的因子VIII(r-因子VIII)能力的冷冻干燥的制剂。本发明还涉及在冷冻干燥之前的以及在将冷冻干燥的固体制剂复溶(reconstitution)至可注射液体之后的r-因子VIII的液体制剂。

背景技术

因子VIII是与血液凝固过程有关的重要血浆蛋白质。这一凝固因子的缺乏导致血友病A，血友病A是一种必须通过因子VIII替代疗法来治疗的威胁生命的疾病。通常，提纯的血浆源性因子VIII(p-因子VIII)的浓缩物已经被用于替代疗法。最近，已经可以获得重组制备的因子VIII(r-因子VIII)，其提供不依赖血浆捐献的补充，降低了病毒传播性疾病的风险。

因子VIII是复杂的分子，并且是与活性随时间降低有关的非常敏感的蛋白质。在血液中，其他血液蛋白质如人类血清白蛋白(HSA)和冯维勒布兰德因子(von Willebrandfactor，vWF)协助维持因子VIII的凝固活性。然而，由于病毒传播风险的原因，期望避免在r-因子VIII的药物制剂中存在通过血浆提纯获得的蛋白质。因此，提供其他药学可接受赋形剂的组合物以保护r-因子VIII防止引起活性降低的物理和化学降解以及聚集是必要的。为防止在长期存储期间蛋白质活性降低所通常采用的技术是通过冻干法(冷冻干燥)制备干燥的固体药物制剂。在制药工艺期间、在长期存储期间以及在冷冻干燥的制剂被复溶至施用的溶液之后，药物赋形剂也必须保护因子VIII。

因子VIII的DNA序列被分为6个结构域；3个A结构域、2个C结构域和1个B结构域，并且这种蛋白质含有针对其他凝血因子、vWF、磷脂和金属离子的相互作用位点。因子VIII蛋白质的最小活性形式缺少B结构域并且由与90kDa的重链结合的80kDa的轻链构成(Wang W.等,2003)。目前市场上有全长r-因子VIII药物产品(Bayer公司的CSLBehring公司的Baxter公司的和Baxter公司的和B结构域剔除r-因子VIII药物产品(Wyeth公司的和Wyeth公司的)。

在因子VIII的药物制剂中，所有组分都需要仔细地选择。每种赋形剂都提供保护功能从而在制药工艺、长期存储以及最终复溶和对患者施用过程中保持因子VIII的高收率。另外，考虑所有赋形剂的临床安全。

冻干法的目的(Manning,M.C.等,1989,Tang,X.等,2004,Schwegman,J.J.等,2005)在于将水从制剂中去除，因为在水相中经常发生不利的物理和化学反应。

在冷冻干燥过程中以及在存储期间需要冷冻/冻干保护剂从而通过在蛋白质周围形成无定形基体来保护蛋白质。

加入膨胀剂(bulking agent)作为块体形成剂(cake former)从而在冷冻干燥期间提供机械支撑并且增加药物产品的干重量。因此膨胀剂有助于提供冷冻干燥产品的均匀质量和外观。

可以加入缓冲剂以将pH保持在对于蛋白质而言以及对于产品的治疗用途而言合适的值。