[发明专利]一种带多功能切换阀的全二维高效液相色谱仪及色谱分离方法

说明书

本发明提供了一种带多功能切换阀的全二维高效液相色谱仪，带多功能切换阀的全二维高效液相色谱仪由一维色谱流动相储液器M1、一维色谱高压泵P1、一维色谱进样阀V1、一维色谱色谱柱C1、一维色谱检测器D1、二维色谱流动相储液器M2、二维色谱高压泵P2、多功能切换阀V、多个二维分离柱C2‑1至C2‑8、二维色谱检测器D、馏分收集器F组成。本发明的突出效果是：1.采用多个二维色谱柱进行二维分离，固定相可选择种类多，分离效率高，分离效果好，可实现复杂样品的全成分分离与分析。2.系统设有多个检测器，可以保证分离过程精确控制，改善分离效果。

技术领域

本发明涉及一种全二维高效液相色谱仪及用于全二维色谱分离的方法，属于仪器设备制造技术领域，是一种高效液相色谱分离分析装置。

背景技术

高效液相色谱以高压输送流动相，采用高效固定相及较高灵敏度检测器进行检测，具有高效、快速、应用广泛的特点，目前己经发展成为解决有机物质研究中各种分离、分析难题的关键技术，在药学、生命科学、医学、食品科学、石油化工及环境保护等领域得到广泛的应用。

通常的高效液相色谱仪由储液器、高压泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等组成，应用过程中多采用一根色谱柱进行分离，也就是一维色谱分离。在一维色谱分离过程中，储液器中的洗脱液经高压泵输送经过进样器，载带进样器中的样品进入色谱柱进行分离，被分离组分依次从色谱柱流出进入检测器。对于天然产物、体液等复杂体系，通常一个样品中包含了几十甚至几百种组分，而各组分之间结构相似，量的差别通常又很大，受一维液相色谱分辨率和峰容量等的限制，无法满足复杂分离的需要。

二维液相色谱是在高效液相色谱基础上发展起来的一项技术，它通过在技术上及设备上的改进，采用一个一维色谱柱和一个二维色谱柱，将一维色谱柱分离馏分引入第二色谱柱进行二维分离。与一维液相色谱系统相比，二维色谱的优势在于提供了更大的峰容量，从而能够更为有效地解决复杂体系样品的分析问题。

Jorgenson 等人早在1990 年在研究“中心切割”技术的基础上第一次实现了“全二维切割”，他们将两个定量管连接到一个八通阀上，两个定量管交替采样、进样，实现了二维分离。中国专利“一种制备型多维液相色谱仪”（申请号 201110256302.1），采用一个一维分离柱、一个二维分离柱、两个富集柱和一个二位十通阀，二维分离柱将两个富集柱连接到二位十通阀上，两个定量管交替富集、进样，实现了二维分离。中国专利“一种天然产物的分离方法” （申请号 201210022094.3）采用一个一维色谱柱、一个二维色谱柱、一个富集柱和一个二位六通阀，借助高压泵的关停，利用富集柱富集、进样交替，实现了二维分离。中国专利“一种全二维毛细管液相色谱分离系统”（申请号 200410098443.5），采用一个一维分离柱、二个二维分离柱、一个富集柱、两个六通阀、一个二位十通阀，实现了二维分离。中国专利“全二维超高压高效液相色谱分离系统”（申请号 201010256470.6），采用一个常规高压液相色谱柱、一个超高压液相色谱柱、两个定量环、一个二位十通阀，常规高压液相色谱柱为一维分离柱，超高压液相色谱柱为二维分离柱，利用二位十通阀的旋转使两个定量环交替采样、进样，实现了二维分离。

就目前而言，全二维或多维色谱模式均是通过以六通阀、八通阀、十通阀等接口模式，将一维色谱柱分离馏分引入第二色谱柱进行二维分离。在分离过程中要求二维分离柱短，分析速度快，这使得整个分离效果受到限制。对于大容量的制备分离，现有技术也不能够满足需求，无法直接应用于成分的分离制备。现有技术使用一个一维色谱柱、一个二维色谱柱进行分离，分离过程中每次只能使用最多两种固定相色谱柱进行分离，难于满足复杂样品的分离需要。

发明内容

为解决现有二维色谱技术所存在的缺陷，本发明提供了一种带多功能切换阀的全二维高效液相色谱仪，通过阀的转换切换，使得一维分离流出液依次切换到多个二维色谱柱中进行二维分离，二维色谱分离开的部分由馏分收集器收集。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：