[发明专利]利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法及其应用有效
申请号: | 201610943653.2 | 申请日: | 2016-11-02 |
公开(公告)号: | CN106590020B | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 吴振强;汪梅花;黄涛 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C09B61/00 | 分类号: | C09B61/00;C09B67/54 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞 |
地址: | 511458 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水溶性红曲色素 红曲色素 发酵液 大孔吸附树脂分离 大孔吸附树脂 液态发酵培养基 预处理 应用 冷冻真空干燥 无机盐 水溶性色素 发酵原液 高效分离 固液分离 红曲霉菌 洗脱剂 洗脱液 提纯 乙醇 去除 吸附 洗脱 发酵 | ||
1.一种利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)发酵液的预处理:将液态发酵好的红曲霉菌发酵原液进行固液分离,取液体,得到胞外水溶性红曲色素发酵液;
(2)树脂的预处理:将大孔吸附树脂进行预处理,得到湿树脂;
(3)吸附:将步骤(2)中得到的湿树脂加入到步骤(1)中得到的胞外水溶性红曲色素发酵液中进行吸附,固液分离,取固体,得到滤饼;
(4)解吸:将步骤(3)中得到的滤饼用乙醇进行洗脱,固液分离,收集液体,得到洗脱液;
(5)去除洗脱剂:将步骤(4)中得到的洗脱液除去洗脱剂,得到浓缩液;
(6)真空干燥:将步骤(5)中得到的浓缩液进行冷冻真空干燥,得到水溶性红曲色素;步骤(2)中所述的大孔吸附树脂为大孔吸附树脂DA201。
2.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于:
步骤(3)中所述的吸附包括通过静置方式进行静态吸附和通过振荡的方式进行吸附;
步骤(4)中所述的洗脱为静态洗脱或动态梯度洗脱。
3.根据权利要求2所述的利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于:
所述的静态洗脱的方法通过如下步骤实现:将得到的滤饼装入容器中,加入乙醇,静置进行洗脱;
所述的动态梯度洗脱的方法通过如下步骤实现:将得到的滤饼装入常压层析柱,用2倍柱体积的不同浓度的乙醇进行梯度洗脱。
4.根据权利要求2所述的利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于:
所述的吸附的时间为0.15~2.5 h;
所述的洗脱的时间为0.15~2.5 h。
5.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的将大孔吸附树脂进行预处理的方法通过如下步骤实现:
(a)将大孔吸附树脂用乙醇浸泡,再用乙醇冲洗,洗至流出的乙醇无浑浊,然后用水洗至无醇味;
(b)接着用HCl溶液浸泡,用水洗至中性,再用NaOH溶液浸泡,用水洗至中性,得到处理后的大孔吸附树脂;
(c)到此终止;或重复步骤(b)2~3次。
6.根据权利要求5所述的利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于:
步骤(a)中所述的乙醇的浓度为体积百分比95%;
步骤(a)中所述的用乙醇浸泡的时间为8~24 h;
步骤(a)和步骤(b)中所述的水为蒸馏水或去离子水;
步骤(b)中所述的HCl溶液的浓度为体积百分比2~8%;
步骤(b)中所述的用HCl溶液浸泡的时间为2~8 h;
步骤(b)中所述的NaOH溶液的浓度为体积百分比2~8%;
步骤(b)中所述的用NaOH溶液浸泡的时间为2~8 h。
7.根据权利要求1所述的利用大孔吸附树脂分离水溶性红曲色素的方法,其特征在于:
步骤(3)中所述大孔吸附树脂添加量为按每mL胞外水溶性红曲色素发酵液配比0.2~0.5g大孔吸附树脂计算。
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