[发明专利]一种带叶兜兰的组培快繁育苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种带叶兜兰的组培快繁育苗方法，属于组培苗的培育技术领域。

背景技术

兜兰属( Paphiopedilum )植物，花形奇特，花色艳丽，是人们最喜爱的兰科植物之一，人们常称兜兰为“拖鞋兰”、“仙履兰”。近十几年来，由于生态环境破坏等原因，不少种类已经到了灭绝的边缘。为了缓解对野生植株的采集压力，保护濒危物种，以及满足人们对兜兰属植物的需求，国内外学者对兜兰植物的人工繁殖进行了大量地研究。目前，部分兜兰种类的无菌播种和组织培养技术已获成功，但是带叶兜兰在组培过程中发芽率低，种苗生根率低，生长缓慢，成活率低，制约着兜兰的人工繁育。因此，提供一种带叶兜兰的组培快繁育苗方法具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种带叶兜兰的组培快繁育苗方法，以解决带叶兜兰种子发芽率低、种苗生根率低、生长缓慢的问题，加快带叶兜兰种苗的生长繁殖，满足大规模种植带叶兜兰的需要。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种带叶兜兰的组培快繁育苗方法，包括的步骤有带叶兜兰种子消毒处理、种子萌发培养、原球茎培养、生根培养以及试管苗移栽，所述种子萌发培养采用的培养基为3/4MS+20g/L蔗糖+0.1g/LKT+0.3 mg/L活性炭+6-7g/L琼脂粉，PH5.8-5.5，暗培养30-50天，培养温度25±1℃；所述原球茎培养采用的培养基为3/4MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LBA+0.3mg/L活性炭+20g/L香蕉+6-7g/L琼脂粉，PH5.8-5.5，光照培养12hr/d，光照强度1200-1500LUX，培养温度25±1℃。

优选的，所述带叶兜兰种子消毒处理的具体步骤为：（1）取带叶兜兰种子用肥皂水冲洗，之后用无菌水冲洗；（2）再用0.1%升汞浸泡15分钟，之后用无菌水冲洗；（3）最后用95%酒精浸泡10分钟，之后用无菌水冲洗。

优选的，所述生根培养采用的培养基为3/4MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LNAA+0.1 mg/LBA +20g/L香蕉+6-7g/L琼脂粉，PH5.8-5.5，光照培养12hr/d，光照强度1200-1500LUX，培养温度25±1℃。

优选的，生根培养60-90天后，再炼苗7-15天，用0.1%甲基托布津处理幼苗后移栽，室温15-28℃，空气湿度70%-80%，遮阴65-70%。

与现有技术相比，本发明的有益效果如下：通过本发明的技术方案，在带叶兜兰进行种子萌发培养以及原球茎培养这两个阶段采用了适于带叶兜兰组培的培养基，使得带叶兜兰发芽率高，在这两个阶段的使用的培养基中使用活性炭以及琼脂粉，提高了带叶兜兰在这两个阶段所使用的培养基的营养成分，进一步地提高了带叶兜兰种子发芽率和种苗生根率。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对发明进行进一步介绍：

一种带叶兜兰的组培快繁育苗方法，包括以下步骤：

1、带叶兜兰种子消毒处理：具体步骤为：（1）取带叶兜兰种子用肥皂水冲洗，之后用无菌水冲洗；（2）再用0.1%升汞浸泡15分钟，之后用无菌水冲洗；（3）最后用95%酒精浸泡10分钟，之后用无菌水冲洗。

2、种子萌发培养：种子萌发培养采用的培养基为3/4MS+20g/L蔗糖+0.1g/LKT+0.3 mg/L活性炭+6-7g/L琼脂粉，PH5.8-5.5，暗培养30-50天，培养温度25±1℃。

3、原球茎培养：原球茎培养采用的培养基为3/4MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LBA+0.3mg/L活性炭+20g/L香蕉+6-7g/L琼脂粉，PH5.8-5.5，光照培养12hr/d，光照强度1200-1500LUX，培养温度25±1℃。

4、生根培养：生根培养采用的培养基为3/4MS+20g/L蔗糖+0.2mg/LNAA+0.1 mg/LBA +20g/L香蕉+6-7g/L琼脂粉，PH5.8-5.5，光照培养12hr/d，光照强度1200-1500LUX，培养温度25±1℃。

5、试管苗移栽：进行试管苗移栽的条件为生根培养60-90天后，再炼苗7-15天，用0.1%甲基托布津处理幼苗后移栽，室温15-28℃，空气湿度70%-80%，遮阴65-70%。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。