[发明专利]一种松针化学成分的检测方法

说明书

本发明提供了一种松针化学成分的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，所述方法以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，以甲醇‑磷酸水溶液作为流动相，进行梯度洗脱；本发明检测方法具有精密度高、稳定性好、重复性高的优点，该方法准确可靠，可用于松针药材的质量控制。

技术领域

本发明涉及药学领域，具体涉及一种松针中化学成分的检测方法。

背景技术

松针是松科植物马尾松Pinus massoniana Lamb.的针状叶，其味酸、苦、涩，性温，无毒，具有祛风燥湿，杀虫止痒，活血安神的功效[松针临床应用及药理研究概况，黄顺东，实用中医药杂志，2005,21卷第8期]。在古代我国就已利用松针来治疗疾病。据《别录》记载松针有“:主风湿疮、生毛发、安五脏”的作用《会约医镜》中记有“辟瘟疫气”明代的《本草纲目》中记载着“炙暑冻疮；去风痛脚痹，杀米虫”等等，中医认为松针味苦，无毒、性温、有祛风、活血、明目、安神、解毒、止痒、去疲劳等功效。主治流行性感冒，风湿关节痛、跌打肿痛、夜盲症、高血压、神经衰弱、冻疮、慢性支气管炎等疾病。现代研究表明松针中含有丰富的营养成分，如马尾松针中含蛋白质、脂肪、多缩戊糖、钙、磷、叶绿素、胡萝卜素、并含有18种以上的氨基酸、40余种矿物元素、多种维生素[我国松针的开发利用研究及进展，刘晓庚等，林产化工通讯，2003，第37卷第4期]。除上述营养成分外，松针中还含有多种药理活性成分，如：黄酮类化合物、莽草酸、木脂素等[松针功能性成分及应用研究进展，陈英等，安徽农业科学，2012，第40卷第10期]。

松针黄酮(pinececdie flaronoid，PF)是一种由黄酮类化合物组成的萃取物，主要是由一些黄酮和黄酮苷及其多聚合体化合物前花青素组成，研究表明PF具有具有扩张动脉血管，抑制ACEI酶和改善微循环，抗炎，抗氧化，消除自由基等作用[松针黄酮类物质药理作用研究进展，陈良胜等，中外医疗，2012，第17期]。刘红煜等人以高糖高脂饮食诱导肥胖大鼠造成氧化应激状态和脂代谢紊乱，以松针总黄酮灌胃给药，考察松针总黄酮抗氧化调血脂作用，结果表明，松针总黄酮能提高肝脏抗氧化酶活性，降低MDA含量，可显著改善肥胖大鼠的氧化应激状态，具有调血脂作用[松针总黄酮抗氧化调血脂作用研究，刘红煜等，中医药信息，2013，第50卷第1期]。

松针作为松树类植物的主要副产物之一，是一种再生速度快、一年四季均可采收、分布广泛、天然蓄积量大、可持续利用的天然再生资源。由于松针药材来源广泛，资源丰富，且具有极好的药用价值，在《四川省藏药材标准》(2014年版)、《湖南省中药材标准》(2009年版)，《北京市中药材标准》(1998年版)、《广西中药材标准》(1996年版)中均收录了该药材，但目前均无相关的含量测定项目，使得松针药材的质量控制成为一个空白。松针黄酮是松针中较为重要的一类活性成分，其临床应用已得到越来越广泛的关注，本发明人经过长期的科研实践，建立了松针中黄酮类成分的高效液相色谱检测方法，可用于松针中槲皮素、山柰酚、飞燕草素、矢车菊素等活性成分的定性和定量分析，为工业生产中松针药材的质量控制提供了可靠的支持。

发明内容

本发明提供了一种松针化学成分的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，所述方法以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，以甲醇-磷酸水溶液作为流动相，梯度洗脱，其中，所述所述磷酸水溶液的体积百分比浓度为0.1％～0.5％；

本发明所述检测方法中检测波长为370nm和530nm；

优选地，所述梯度洗脱条件为：

0～20min，37％甲醇，63％磷酸水溶液；

20～25min，37％-50％甲醇，63％-50％磷酸水溶液；

25～45min，50％甲醇，50％磷酸水溶液；

优选地，所述检测方法中柱温为30℃，流速为1.0ml/min，进样量为10μl；

优选地，所述磷酸水溶液的体积百分比浓度为0.4％；