[发明专利]一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防治方法有效
申请号: | 201610977913.8 | 申请日: | 2016-11-08 |
公开(公告)号: | CN106591376B | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | 吕瑞军;靳梦潇 | 申请(专利权)人: | 吕瑞军 |
主分类号: | C12P1/04 | 分类号: | C12P1/04;C12P1/02;C12N1/20;C12N1/14;A01N65/38;A01N65/44;A01N63/20;A01N63/38;A01N63/30;A01P7/04;A01P5/00;C12R1/23;C12R1/885;C12R1/79 |
代理公司: | 北京一格知识产权代理事务所(普通合伙) 11316 | 代理人: | 滑春生;赵永伟 |
地址: | 250000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 防治 地下 线虫 微生物 培养 制备 方法 及其 | ||
1.一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物,其特征在于,包括嗜酸乳杆菌培养物、哈茨木霉培养物、淡紫拟青霉培养物,其中按照重量分数嗜酸乳杆菌培养物:哈茨木霉培养物:淡紫拟青霉培养物=60:20:20的比例配成固体发酵母液,发酵母液接种于由烟草末,博落回,苍耳子,艾叶,蓖麻饼,玉米,豆粕,糖蜜按比例配成的发酵基质中进行厌氧发酵得微生物培养物;
所述发酵基质由以下重量分数配比组成:烟草末20%,博落回15%,苍耳子10%,艾叶5%,蓖麻饼30%,玉米8%,豆粕10%,糖蜜2%,糖蜜以外的基质用粉碎机粉碎至40目筛,用不锈钢混合搅拌均匀,按照比例配成发酵基质。
2.根据权利要求1所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)嗜酸乳杆菌培养物的具体培养步骤如下:a、斜面嗜酸乳杆菌种活化;b、三角瓶种子培养;c、二级种子培养;d、种子发酵罐发酵培养;e、发酵罐放大培养,部分进行液体产品分装,部分进行固体发酵培养后进行固体产品分装;
2)哈茨木霉培养物的具体培养步骤如下:a、PDA培养基平板活化种;b、用无菌水和接种铲刮取哈茨木霉孢子,制备孢子液;c、发酵罐液体发酵培养;d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得哈茨木霉固体培养物;
3)淡紫拟青霉培养物的具体培养步骤如下:a、PDA培养基平板活化种;b、用无菌水和接种铲刮取淡紫拟青霉孢子,制备孢子液;c、发酵罐液体发酵培养;d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得淡紫拟青霉固体培养物;
4)将烟草末,博落回,苍耳子,艾叶,蓖麻饼,玉米,豆粕,糖蜜按比例将植物源发酵基质混合搅拌,蒸汽灭菌后冷却至37-40℃,接种按比例配成的液体菌种搅拌均匀接入厌氧发酵袋内,发酵袋热合封口移入发酵室发酵、检测后成品混合。
3.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌培养采用的培养基由以下重量的组分组成:葡萄糖:20克;蛋白胨:10克;牛肉膏:10克;酵母膏:10克;乙酸钠:5克;柠檬酸铵:2克;磷酸氢二钾:2克;硫酸镁:0.5克;硫酸亚铁:0.3克;硫酸锰:0.2克;水:1000克。
4.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法,其特征在于,所述PDA培养基由以下重量的组分组成:马铃薯:200克;蔗糖:20克;水:1000克。
5.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法,其特征在于,所述液体发酵培养基由以下重量的组分组成:葡糖糖:160克;硝酸钠:10克;硫酸铵:5克;黄豆饼粉:5克;磷酸氢二钾:1.5克;硫酸镁:1.5克;碳酸钙:2克;水:1000克。
6.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法,其特征在于,所述固体发酵培养基包括固体基质和营养液,所述固体基质由以下重量分数的组分配成:小麦麸皮:30%;稻壳粉:30%;胚芽粕:20%;蓖麻饼粉:10%;豆粕粉:10%;营养液质量浓度为:糖蜜:20g/L;硫酸铵:4g/L;硝酸钠:4g/L;磷酸氢二钾:2g/L。
7.根据权利要求1所述的一种地蛆及地下线虫的微生物培养物的防治方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)筛选具有极好渗透性及生物驱避 性的嗜酸乳杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉三株有益微生物在培养基中培养、发酵,制成固体发酵母液,选择对地蛆、地下线虫具有生物抗性和驱杀功能的烟草末,博落回,苍耳子,艾叶,蓖麻饼,玉米,豆粕,糖蜜,按照比例配成植物源发酵基质;
2)将配好的固体发酵母液通过菌种罐喷雾装置均匀喷于植物源发酵基质上,边喷边搅拌,喷完再搅拌10-12分钟,接入发酵袋中置20-30℃室温中发酵8-10天使用;
3)选择晴天傍晚时分,将发酵好的培养物沿作物根系均匀洒施中土壤表层,然后小心浇灌至地表全部湿润。
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