[发明专利]森林山蛭抗血栓肽Sylvestin及其基因和应用

说明书

本发明涉及一种森林山蛭(Haemadipsa sylvestris)抗血栓肽Sylvestin及其基因和应用，属于生物医学技术领域。森林山蛭抗血栓肽Sylvestin是森林山蛭镇痛肽基因编码的一种单链多肽，分子量4790.5道尔顿，等电点6.28。森林山蛭抗血栓肽Sylvestin由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。编码森林山蛭抗血栓肽Sylvestin的基因，由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列组成。本发明森林山蛭抗血栓肽Sylvestin能够抑制FXIIa和kallikrein，有极显著的抗血栓和抑制急性脑出血的作用；该抗血栓肽具有结构简单、人工合成方便、抗血栓活性强，能作为制备FXIIa、kallikrein抑制剂和抗血栓和抑制急性脑出血药物应用。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种森林山蛭(Haemadipsasylvestris)抗血栓肽Sylvestin及其基因和应用。

背景技术

脑血管疾病是导致我国中老年人死亡的主要病因之一，也是世界性卫生战略研究重点之一。在脑血管疾病中，急性缺血性疾病的发病率居于首位，具有致残率高、死亡率高和复发率高的特点。全球脑卒中病死逾150万例/年，随着老年人口的增加呈逐年增长的趋势，严重威胁着人类生命健康和生活质量。因此，研究治疗急性脑缺血的药物具有巨大的社会需求和重要的社会意义。

急性脑缺血的主要病因是脑血管栓塞，这是由于脑血管中血栓形成导致血流不畅，进而造成血管梗死的结果。治疗急性脑缺血的关键措施之一是解除血管栓塞，恢复缺血区血液供应。因此，溶栓治疗成为临床治疗急性脑缺血的关键环节。溶栓药物的应用被临床证明能有效解除脑缺血，成为治疗急性脑缺血的主要方向。目前被美国FDA批准的抗脑缺血药物只有t-PA(组织型纤溶酶原激活物)一种，但该药仅在发病3h有效。t-PA的作用靶点是纤溶酶原，会导致较高的出血发生率。以FXIIa(激活型凝血酶原十二因子)和kallikrein(激肽释放酶)为作用靶点的药物出血倾向非常低，因此以它们为作用靶点，研究和开发新型药效好、副作用低的治疗抗血栓药物，具有良好的社会经济效益和市场前景。

蛭类是我国的一种传统中药，两千多年前的《神农本草经》中就有描述。《本草纲目》谓其：“咸走血，苦胜血。水蛭之咸苦，以除蓄血，乃肝经血分药，故能通肝经聚血。”中医认为水蛭是一种传统的破血药，有逐瘀、通经脉、利水道的功效，主要用于治疗血瘀经闭、中风偏瘫、跌打损伤等疾病。2005年，欧洲正式批准蛭类疗法为合法的治疗手段。每年仅在德国就有35万条水蛭用于医疗。

森林山蛭(Haemadipsa sylvestris)，又称草蛭。蛭纲,水蛭科。体略呈长椭圆形，长约3厘米。该物种的模式产地在缅甸长林山。分布于印度尼西亚、缅甸、印度、越南以及中国大陆的云南等地。主要栖息于潮湿的山区草地或竹林里以及水附近或水中。当人畜经过时，就附着吸食血液。山蛭能分泌抗凝血的物质，破坏凝血功能。因此被山蛭咬过的伤口常流血不止。民间也利用这一性质，用山蛭来治疗病人的局部血流不畅。我们首次从森林山蛭中识别了一个作用很强的FXIIa和kallikrein抑制剂Sylvestin。

本发明涉及的多肽Sylvestin能够抑制血栓形成。通过动物模型证实它具有很强的抗血栓和抑制急性脑缺血活性。发明人将本发明的森林山蛭抗血栓肽Sylvestin全序列氨基酸结构经蛋白质数据库进行搜寻比较，未发现有任何相同多肽。发明人将本发明的森林山蛭抗血栓肽Sylvestin编码基因经基因数据库进行搜寻比较，未发现有任何相同基因。

发明内容

本发明的目的是基于上述理论研究和现有技术基础，提供一种新的具有强烈的抗血栓性的森林山蛭Sylvestin肽及其基因和应用。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下技术方案：