[发明专利]一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法有效
| 申请号： | 201610991891.0 | 申请日： | 2016-11-11 |
| 公开（公告）号： | CN106706575B | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 王永祥;耿凤华;姜香宇;瞿鹏;徐茂田 | 申请（专利权）人： | 商丘师范学院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人： | 程茗 |
| 地址： | 476000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 荧光 荧光分析 混合液 四链体 分析检测技术 单链DNA分子 长度不等 硫代黄素 双重放大 水浴处理 荧光标记 荧光信号 标记DNA 双链DNA 灵敏度 非标记 缓冲液 自组装 富含 碱基 双链 嵌入 备用 震荡 诱导 | ||
1.一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一、选取两条长度不等且均富含T和G两种碱基的非标记单链DNA分子A和B，分别配制成溶液A和溶液B，将两种溶液分别于90℃水浴5 min，冷却至室温，备用；所述非标记单链DNA分子A和B均在分子链的一端富T，另一端富G；所述非标记单链DNA分子A和B中的G碱基数的比为4:8，非标记单链DNA分子A和B的匹配长度为7-10个连续的T碱基；
步骤二、将所得溶液A、溶液B与硫代黄素溶液进行混合，得混合物Ⅰ；将混合液Ⅰ与Tris-HNO3缓冲液进行混合，得混合液Ⅱ；其中混合液Ⅱ中非标记单链DNA分子A的摩尔浓度为0.5-1.5μmol/L，非标记单链DNA分子B的摩尔浓度为0.5-1.5μmol/L，硫代黄素的摩尔浓度为2μmol/L；
步骤三、向混合液Ⅱ中加入Hg2+，使混合液Ⅱ中Hg2+浓度为0.3 - 4µmol/L；将加入Hg2+的混合液Ⅱ置于室温下震荡30min，然后在450 nm激发波长下测定荧光强度值，根据测定的荧光强度值计算Hg2+的浓度。
2.如权利要求1所述的一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法，其特征在于：所述非标记单链DNA分子A和B的匹配长度为9个连续的T碱基。
3.如权利要求1所述的一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法，其特征在于：步骤二所述Tris-HNO3缓冲液中包含20mmol/L的Mg2+。
4.如权利要求1所述的一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法，其特征在于：步骤二所述混合液Ⅰ中非标记单链DNA分子A和B的摩尔数相等。
5.如权利要求1-4任意一种所述的一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法，其特征在于：所述步骤二的具体操作步骤为：将10μL摩尔浓度为100μmol/L的溶液A、10μL摩尔浓度为100μmol/L的溶液B 和 10μL 摩尔浓度为200μmol/L的硫代黄素溶液进行混合，得混合液Ⅰ；再将混合液Ⅰ溶于 970μL 摩尔浓度为10mmol/L的Tris-HNO3缓冲液混合均匀，得混合液Ⅱ。
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