[发明专利]一种代代花萼萃取物及制法与在制备减肥药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种代代花萼萃取物及其制备方法与在制备减肥药物中的应用。

背景技术

代谢综合征是多种代谢异常症候群的总称，包括肥胖、胰岛素抵抗，血脂异常，高胰岛素血症、高血压等。在这些代谢异常中，肥胖首当其冲，成为其他代谢异常的首要体现，已经在全球范围内危害着人类的健康。Ⅱ型糖尿病、高血压、心脑血管疾病、肿瘤等多种疾病的发生、发展都与肥胖有着密切的关系。目前肥胖已成为危害人类健康的全球性健康问题，它与Ⅱ型糖尿病、高血压、心脑血管疾病、肿瘤等多种疾病的发生、发展密切相关。

3T3-L1前脂肪细胞分离自小鼠胚胎(17～19d)的Swiss 3T3细胞，能特异性地被诱导分化成成熟的脂肪细胞。由于小鼠前体脂肪细胞的取材较为方便，并且关于小鼠前体脂肪细胞的培养研究技术较成熟，使得3T3-L1前脂肪细胞已成为国际上公认的研究脂肪代谢的细胞模型。越来越多的研究发现中药可通过抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖发挥预防或减肥的功效。比如于华强等利用MTT法以及油红O染色法研究不同浓度的芹菜素对前脂肪细胞增殖以及分化的影响，实验结果表明，芹菜素能够显著地抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖以及分化，并呈剂量依赖性，提示芹菜素可能具有预防或治疗肥胖的作用。

代代(Citrus aurantium L.var.amara Engl)是芸香科柑橘属植物酸橙的一个变种，代代花是其花蕾的干品，具有良好的药理作用，常用于治疗气郁不舒、脘腹胀痛、积食不化、恶心呕吐等。目前国内外对代代花的研究主要以其挥发油类化合物为主，而对代代花其它有效成分的研究报道几乎没有。代代花作为药食两用价值的天然保健品，其有效成分的提取纯化和药理活性等方面的研究还有待进一步深入探讨，全面加强代代花的生物利用，对于开发新药、指导临床用药具有重要的意义。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种代代花萼萃取物的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述制备方法制备得到的代代花萼萃取物。

本发明的再一目的在于提供上述代代花萼萃取物在制备减肥药物中的应用。

本发明的目的通过下述方案实现：

一种代代花萼萃取物的制备方法，包含如下步骤：

(1)将代代花萼(Citrus aurantium L.var.amara Engl)干燥，粉碎过筛，得代代花萼粗粉；

(2)采用乙醇溶液加热回流提取代代花萼粗粉，然后将提取液离心，并将上清液浓缩，干燥至恒重，得到代代花萼乙醇粗提物(记为CAV-I)；

(3)将代代花萼乙醇粗提物用蒸馏水溶解，加入石油醚进行萃取，重复萃取数次，去除石油醚相；在去除石油醚相后的溶液中加入氯仿进行萃取，重复萃取数次，分别收集氯仿相和取出氯仿相后的溶液，将氯仿相浓缩蒸干，得到氯仿相萃取物(记为CAV-II)；

(4)向取出氯仿相后的溶液中加入乙酸乙酯进行萃取，重复萃取数次，合并乙酸乙酯相，浓缩蒸干，得到乙酸乙酯相萃取物(记为CAV-III)。所述代代花萼萃取物为代代花萼乙醇粗提取物、氯仿相萃取物和/或乙酸乙酯相萃取物。

步骤(1)中所述干燥的温度为40～60℃；所述干燥时间为18～24h；所述粉碎过筛为40～60目筛。

步骤(2)中所述乙醇溶液的体积分数为70～90％。

步骤(2)中所述乙醇溶液与代代花萼粗粉的体积质量比为(10～30)mL:1g。

步骤(2)中所述加热回流提取的温度为80～100℃；所述加热回流提取次数为2～5次，每次提取的时间为1～3h。

步骤(2)中所述离心的转速为3000～5000r/min；所述离心的时间为8～12min。

步骤(2)中所述干燥的温度为40～60℃。

步骤(3)所述代代花萼乙醇粗提物与蒸馏水的质量体积比为1g：(10～20)mL。

步骤(2)、(3)和(4)中所述的浓缩的方式为减压浓缩；

步骤(3)中所述萃取的时间都为30～60min；步骤(4)中所述萃取的时间为30～60min；

步骤(3)中所述萃取次数都为3～5次；步骤(4)中所述萃取次数都为3～5次。

一种代代花萼萃取物(CAV-I、CAV-II、CAV-III)，通过上述制备方法制备得到；

所述的代代花萼萃取物(CAV-I、CAV-II、CAV-III)在制备减肥药物中的应用；