[发明专利]一类标记和/或检测细胞中脂滴的荧光探针及其制备和应用在审
申请号: | 201610998399.6 | 申请日: | 2016-11-14 |
公开(公告)号: | CN108069902A | 公开(公告)日: | 2018-05-25 |
发明(设计)人: | 徐兆超;邓霏 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C07D221/14 | 分类号: | C07D221/14;C09K11/06;G01N21/64 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
地址: | 116023 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 荧光探针 脂滴 制备和应用 荧光成像 生物分析检测 生物医学领域 萘二甲酸酐 细胞 定位基团 光稳定性 起始原料 探针制备 烷基长链 稳定基团 细胞标记 荧光增强 萘酰亚胺 尼罗红 荧光团 检测 产率 氟硼 类脂 探针 萘环 合成 应用 | ||
1.一类标记和/或检测细胞中脂滴的荧光探针,其特征在于:具有如下结构通式(I):
R为含氮基团,选自N,N-二甲基,氮丙啶,氮杂丁环,四氢吡咯基,哌啶基。
2.根据权利要求1所述的荧光探针,其特征在于:以1,8-萘酰亚胺为荧光母体,烷基长链为定位基团,萘环4位的含氮基团为荧光增强及稳定基团。
3.根据权利要求1所述荧光探针的制备方法,其特征在于:
合成步骤如下:
1)N-十二烷基-4-溴-1,8-萘酰亚胺的合成:将4-溴-1,8-萘酐按0.02-0.1g/mL比例用乙醇溶解,再加入相对于4-溴-1,8-萘酐1.5-2倍摩尔质量的十二烷基胺,80-100℃下回流反应8-12小时,停止加热,降至室温,将析出的固体过滤,用乙醇洗涤得到N-十二烷基-4-溴-1,8-萘酰亚胺;
2)荧光探针的合成:将N-十二烷基-4-溴-1,8-萘酰亚胺在氮气保护条件下按0.5-1g/mL比例用乙二醇单甲醚溶解,再加入1-2倍摩尔质量的仲胺化合物,130-150℃条件下氮气保护搅拌反应8-12小时,旋干溶剂,柱层析分离得到荧光探针。
4.按照权利要求3所述的制备方法,其特征在于:
步骤1)中析出的固体过滤后,用乙醇洗涤的次数为1-3次;
步骤2)中所述仲胺化合物选自N,N-二甲基胺、氮丙啶、氮杂丁环、四氢吡咯或哌啶;
步骤2)中所述柱层析的洗脱剂为石油醚、二氯甲烷、甲醇中的一种或混合。
5.一种权利要求1所述荧光探针在标记和/或检测生理体系中脂滴的应用。
6.按照权利要求5所述的应用,其特征在于:荧光探针在标记和/或检测细胞中脂滴的应用。
7.按照权利要求6所述的应用,其特征在于:所述细胞为肿瘤细胞及正常组织来源的细胞。
8.按照权利要求7所述的应用,其特征在于:所述肿瘤细胞包括HT-29细胞;所述正常组织来源的细胞包括CHO细胞。
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