[发明专利]防治黄曲条跳甲的苏云金芽孢杆菌及制剂与应用

说明书

本发明属于微生物农药制备技术领域。具体涉及防治黄曲条跳甲的苏云金芽孢杆菌及制剂与应用。分离得到一株对黄曲条跳甲具有高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)HAN055，由该菌株制成的制剂WP‑HAN055对黄曲条跳甲具有显著的防治效果。所述的苏云金芽孢杆菌HAN055保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2015608。

技术领域

本发明属于微生物农药制备技术领域。具体涉及防治黄曲条跳甲的苏云金芽孢杆菌及制剂与应用。

背景技术

跳甲(flea beetle)，属于鞘翅目(Coleoptera)叶甲科(Chrysomelidae)跳甲亚科(Alticinae或Halticinae)昆虫，其色暗或具金属光泽，后足膨大健壮，善于跳跃，在世界各地都有广泛的分布。跳甲主要危害十字花科蔬菜，以及茄果类瓜类等，其中，黄曲条跳甲的危害尤为严重。

黄曲条跳甲(Phllotreta striolata)是一种重要的地下虫害，主要危害农作物的种子、根、茎等。受其危害最为严重的是十字花科(Brassicaceae)植物，包括甘蓝、油菜、白菜、萝卜等，是世界性的害虫之一(贺华良，2012)。其幼虫和成虫均能够危害农作物，幼虫取食根皮，咬断须根，致使地上部分的植株叶片变黄萎焉而死；成虫则主要取食叶片，咬食叶肉，造成许多细密的小孔，进而影响植株的正常生长而死亡(伍海森，2005)。更重要的是跳甲成虫和幼虫对植株造成的伤口，很容易被其他病原菌利用继而侵染植株，从而引起其他疾病的发生，如软腐病、根肿病等病害的病原菌从跳甲幼虫咬食后的伤痕侵染植株体内，造成病害的发生。

目前，跳甲的主要防治措施有：(1)农业防治：及时处理农作物残体落叶；播种前深耕晒土；实行轮作的耕作制度。(2)化学农药防治：化学农药防治是跳甲防治的主要手段，常用的农药有90％晶体敌百虫、50％辛硫磷乳油、21％灭杀毙等。(3)黑光灯诱杀：因为跳甲成虫对黑光灯比较敏感，人们利用它的这一特点进行诱导捕杀，对防治有一定的效果。

目前人们防治跳甲的手段和方法主要是应用化学农药。但是化学农药的具有毒性高、降解周期长等缺点，长期使用后对生态环境和食品安全造成严重的问题。在这种背景下，除了继续探索低毒、低残留、低污染的化学农药外，生物农药作为一种“绿色农药”，其对病虫害防治效果高、多种活性成分和药效因子共同发挥作用，使得病虫害难以对其产生药物抗性，而且使用后几乎不会对人类和环境造成农药残留问题等负面问题，逐渐成为继化学农药之后一个新的研究和关注的热门。目前，在黄曲条跳甲的生物防治中，首先利用昆虫病原线虫防治跳甲虫害；其次，利用生物学技术手段对作物进行基因改造，获得具有抗跳甲虫害的新性状也是防治跳甲的一种重要方式；另外，新一代的调控型“农药”植物次生物质作为也被用来防治跳甲。然而，在微生物防治跳甲领域，除了利用抗生素农药(如1.8％阿维菌素乳油等被应用外，还有报道一些虫生真菌能够对跳甲具有一定的防效。但是目前商业化的生物农药的产品种类和数量仍然很少。

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)简称B.t，属于革兰氏阳性菌，在生长后期能够形成内生芽孢的细菌，自然界土壤中广泛的分布。在《伯杰细菌鉴定手册》第九版中，苏云金芽孢杆菌归为第二类、第十八群，属于形成于内生芽孢的杆菌和球菌部，芽孢杆菌科，芽孢杆菌属的一个种(关雄1997)。

苏云金芽孢杆菌区别于蜡状芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌的最显著的特征是，在芽孢形成的同时，会在菌体的一端或两端形成一种杀虫晶体蛋白(Insecticidal CrystalProtein，ICPs)，是一种碱性蛋白。这种杀虫晶体蛋白由一个或多个多肽组成，其晶体的形状、大小因菌株的不同而异，形状有菱形、圆形、方形、米粒型或其他一些不规则形状等。杀虫晶体蛋白对敏感昆虫有特异性的毒杀作用，如鞘翅目、鳞翅目、双翅目、膜翅目等昆虫，由于其作用的专一性，只对特异的靶标生物具有生物活性，而不会对人、畜等的健康造成危害，因而苏云金芽孢杆菌制剂被广泛的应用于农业害虫的防治(Carlberg et al 1995)。