[发明专利]洛塞那肽及其类似物的制备方法

权利要求书

1.洛塞那肽的制备方法，其特征在于：

1）以氨基树脂为原料，加入脱保护剂，脱除氨基树脂的保护基；

2）将上步所得的树脂，采用逐一缩合的方式，按照洛塞那肽的肽序依次连接带有保护基的氨基酸，缩合反应包括加入缩合剂，加入有机碱；

3）加入脱保护剂至步骤2所得产物中，脱除氨基酸的Fmoc保护基，得到洛塞那肽的树脂肽；

4）上述步骤3）所得的树脂肽经裂解液处理，去除树脂和保护基，得到相应肽的粗品；

5）粗品经纯化、冻干得精品；

步骤1）中所述氨基树脂为Rink Amide-AM树脂；

步骤2）中的缩合试剂为3-(二乙氧基邻酰氧基)-1,2,3-苯并三嗪-4-酮，有机碱为N,N-二异丙基乙胺；

步骤2）的缩合温度为10~30℃；

步骤4）中裂解液选自三氟乙酸、1,2-乙二硫醇、三异丙基硅烷和水组成的混合物或者选自三氟乙酸、二硫苏糖醇、三异丙基硅烷和水组成的混合物；

步骤4）中裂解液与洛塞那肽树脂肽的体积重量比8~15:1。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述洛塞那肽树脂肽结构为：

His(R)-D-Ala-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(trt)-Nle-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-

Arg(pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Gln(trt)-Gly-Gly-Pro-

Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Cys(trt)- 氨基树脂，其中R为Fmoc、Boc或Trt。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中所述氨基树脂载量为0.2~1.5mmol/g。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中所述氨基树脂载量为0.5~1.0 mmol/g。

5.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，氨基酸与树脂的投料摩尔比为2：1~6:1。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4）中裂解液中三氟乙酸：1,2-乙二硫醇或二硫苏糖醇：三异丙基硅烷：水的质量比为85~94:2~5:2~5:2~5。

7.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤4）中裂解反应时间为1~5小时。

8.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤4）中裂解反应时间为为2~4小时。

9.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤5）中洛塞那肽粗品使用高效液相反相纯化方法。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，

制备柱填料；C¹⁸/C⁸类填料；

纯化流动相：流动相A：磷酸盐水溶液，PH范围2.0~7.0；流动相B：乙腈或甲醇；

脱盐流动相：流动相C：水或三氟乙酸水溶液，浓度0~0.5%；流动相D：乙腈或三氟乙酸乙腈溶液，浓度0~0.5%。