[发明专利]七彩竹秆中黄酮类化合物的提取分离和组织化学定位方法

权利要求书

1.一种从七彩竹秆中提取分离黄酮类化合物的方法，利用回流提取法从七彩虹竹秆原料中进行总成分提取，并利用硅胶柱色谱分离，分离出晶体化合物，再经TLC薄层鉴别和光谱解析，得到该植物所含的6种化合物，并进一步进行含量测定。

2.如权利要求1所述的一种从七彩竹秆中提取分离黄酮类化合物的方法，其特征在于所述的总成分提取采用回流提取法，将七彩虹竹秆粉碎，用70％的乙醇在容器中水浴加热冷却回流提取3次，每次1-2小时，重复3次，过滤，合并滤液，丢弃秆渣；用旋转蒸发器仪65℃左右对初提液进行旋蒸，蒸出溶液中的乙醇，得到七彩虹竹秆浸膏。

3.如权利要求1所述的一种从七彩竹秆中提取分离黄酮类化合物的方法，其特征在于所述的硅胶柱色谱分离晶体化合物是采用石油醚与水提液共同萃取上一步骤回流提取所得浸膏，萃取24小时后用分液漏斗分离，分别用石油醚萃取4次，下层为水提物，上层为石油醚萃取物，把4次萃取上层混合，然后上层用旋转蒸发仪旋蒸，把石油醚蒸出，得到石油醚浸膏，把剩下的下层水提物和乙酸乙酯共同混合萃取24小时后用分液漏斗分离，同样用乙酸乙酯萃取4次，下层为水提物，上层为乙酸乙酯萃取物，把五次萃取上层混合，再用旋转蒸发仪旋蒸，蒸出乙酸乙酯，得到乙酸乙酯浸膏，再把剩下的水提物用正丁醇萃取，分别用正丁醇萃取4次，把上层正丁醇萃取物混合，用旋转蒸发仪蒸出正丁醇，得到正丁醇浸膏，最后把水提物层用旋转蒸发仪蒸出蒸馏水，得到水层浸膏；乙酸乙酯萃取部分16.0g用200-300目硅胶柱层析色谱法分离，以100∶-1∶1的石油醚-乙酸乙酯系统梯度洗脱甲柱，称取硅胶，称10倍于上样量；洗脱出的干物质重量、结晶情况待合并完成后，观察并记录洗脱出的干物质重量、结晶情况；

将甲柱18-37馏分用乙酸乙酯溶解，用100-200目硅胶拌样，采用200-300目硅胶柱层析装柱分离，采用10:1石油醚-乙酸乙酯系统进行梯度洗脱，得到馏分，通过TLC薄层色谱法鉴定，合并相同馏分，并观察结晶情况；

同时，将甲柱中石油醚：乙酸乙酯＝5:1洗脱部分得到馏分合并，干燥称重g，用甲醇溶解，用100-200目硅胶拌样，进行200-300目硅胶柱层析分离，采用8:1氯仿-甲醇系统梯度洗脱，得到各馏分，观察结晶情况。

4.如权利要求1所述的一种从七彩竹秆中提取分离黄酮类化合物的方法，其特征在于所述的晶体化合物含量测定采用280nm为检测波长，流动相用乙腈∶水。

5.如权利要求1所述的一种从七彩竹秆中提取分离黄酮类化合物的方法，其特征在于用七彩虹竹秆幼嫩未见光部分为原料，以所含化合物牡荆苷和异牡荆苷作为七彩虹竹含量测定的指标成分进行定量分析。

6.如权利要求1所述的一种从七彩竹秆中提取分离黄酮类化合物的方法，其特征在于所述的从七彩竹秆中提取分离到的黄酮类化合物为化合物1木犀草素、化合物2木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、化合物3荭草苷、化合物4β-谷甾醇、化合物5牡荆苷、化合物6胡萝卜苷。

7.七彩竹中黄酮类化合物的组织化学定位方法，其特征在于以七彩虹竹的健康新鲜的竹秆为材料，取新鲜的竹秆，将竹秆上的竹叶去净，经风干后，粉碎至20目，避光贮存，运用在组织切片的拟检成分起化学反应，形成有颜色的终末反应产物，该产物沉淀在相应成分所在的位置上，用以定位七彩竹秆中黄酮类化合物在组织或细胞内的分布含量，测定七彩竹中黄酮类化合物在不同部位成分的含量。